实验食用菌母种的制作与转管技术资料.pptVIP

实验7  食用菌母种制作与转管技术 实 验 目 的 掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操作技术； 明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重要性。 实 验 原 理 实 验 原 理 1.组织分离法：用子实体的某一部分来分离菌种的方法。 优势：方法简便，后代不易发生变异，是食用菌栽培中防止品性退化，保持优良品种特性常用的一种手段。 实 验 原 理 2.钩悬法 是一种特别适用于耳类，也适用于伞菌类的多孢分离法。 实 验 原 理 3.孢子印分离法?? 取成熟子实体经表面消毒后，切去菌柄，在20～24℃静置一天，大量孢子落下形成孢子印。 接种环沾少量孢子在试管培养基上划线培养。 实 验 材 料 材料：平菇、香菇、杏鲍菇较成熟的子实体 用具：培养皿；试管斜面培养基；酒精灯，接种刀，75%酒精，消毒液；冰箱；培养箱等。 培养基：PDA斜面培养基 1. PDA培养基的配置 配方： 马铃薯浸粉；?5.0g /L；葡萄糖20.0g /L；琼脂? 20.0g /L?；氯霉素0.1g /L。 制法：称取40g溶于1L蒸馏水中，煮沸溶解。分装试管或锥形瓶，121℃高压灭菌15min。? 5. 培养 取接组织的斜面试管放置于25℃的培养箱中培养。 6. 转管 在菌丝长满斜面之前，菌丝生长最旺盛时，挑取菌丝进行转管扩繁。 实验注意事项 （1）组织块分离法对于胶质的耳类及菇体较小较薄的菇类，如金针菇等不太适宜。 （2） 此法应严格遵循无菌操作。 （3）纯化菌丝长至斜面1/2时，挑尖丝转管，培养成再生母种。（4）控制菌龄菌丝即将长满斜面（一般7～10天）终止培养。分别用于菌种保藏或繁衍原种。 （5）出菇试验将再生母种扩成原种、栽培种，使其出菇。看产量、质量、形态、长势、抗性如何，鉴定为优质菌种后，才可供生产使用。 结果与思考题 * * 有氧化型和还原型两种存在形态.前者利用血球计数板在显微镜下直接计数，能立即得到数值，但死活细胞都计数在内。后者是在平板上长成菌落后再计数，反应较真实，但费时太长。具有将氧化型美兰还原成还原型的能力.故由于计数室的容积是一定的，所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来 母种 原种 栽培种 应用：此法适宜多数食用菌，是野外工作者和种菇专业户必须掌握的一种方法。 实 验 步骤 2.种菇的选择 选择无病虫害、典型、八成成熟的食用菌子实体。 3. 环境和种菇消毒 在接种箱内，用镊子夹着燃烧的酒精棉球迅速擦拭菇体。 或选用的子实体用0.1％开汞水或70％酒精表面消毒，用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。 实 验 步骤 实 验 步骤 4.取接组织 将菇体撕开，用无菌尖头镊在柄盖交界处取绿豆粒（0.3～0.4立方厘米）大组织，放入斜面培养基上。迅速塞上棉塞。 如已开伞的种菇、则选菌盖与菌柄交界处的菌肉。 如种菇已受雨淋，吸水较多，应取菌褶作为接种材料。 母种分离视频 实 验 步骤 母种转管视频 1.如何避免因污染而造成的组织分离的失败？ 2.判断你所分离的母钟是否标准？ 3.孢子分离的母种为何一定要做出菇试验？ * 有氧化型和还原型两种存在形态.前者利用血球计数板在显微镜下直接计数，能立即得到数值，但死活细胞都计数在内。后者是在平板上长成菌落后再计数，反应较真实，但费时太长。具有将氧化型美兰还原成还原型的能力.故由于计数室的容积是一定的，所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来 * *