实验一血常规检查资料.ppt

血常规检查 苏州大学附属第二医院检验科 郭 敏 谢晓芳 血常规检查 血常规检查（blood routine examination）指对外周血中红细胞、白细胞和血小板数量和质量的化验检查，包括RBC、Hb、WBC、PLT及白细胞分类计数（DC），同时注意观察血涂片中红细胞及白细胞形态有无异常，某些情况下应注意观察有无异常细胞或寄生虫等。 方法 手工法(显微镜) 手工计数费事费力,精确性、准确性也较差。 血细胞分析仪(三分类,五分类) 准确性、精确性、效率大大提高。 血细胞分析仪 近年来，随着血液分析仪在国内检验科迅速普及，使血常规检验的参数逐渐增多，不仅提高了工作效率和工作质量，而且为临床医生提供了更广泛的参考数据。血液分析仪的白细胞分类计数，先后推出了两分类、三分类、四分类和五分类的仪器。应该说血液分析仪的飞速发展，使血常规检验进入了新阶段，这是医学检验的一大进步。 白细胞分类原理 1.电阻抗法 电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础, 进行白细胞计数和体积测定。 白细胞直方图：两个明显分离的峰：左峰：小细胞群（淋巴细胞：35-90fl）,两峰之间：中间细胞群（中间细胞：90-160fl）的分布。右峰：大细胞群（粒细胞：160-450fl） 异常直方图示例一 异常直方图示例二 分析与实践 该标本镜检结果为幼稚细胞14％。 血小板直方图的应用 拟合曲线的概念。血小板的体积分布呈对数分布。所有在拟合区内的均为血小板，在拟合区外的均非血小板。仪器实际测定的范围为2-20FL,而拟合覆盖范围为2-70FL. 所有不符合拟合规律的血小板严格意义上均应镜检即均不可靠。 2??容量、电导、光散射白细胞分类（VCS） 体积（volume）：电阻抗原理； 电导性（conductivity）：采用高频电磁探针测量细胞内部结构—细胞核、细胞质的比例、细胞内的化学成份； 光散射（scantter）：特别具有对细胞颗粒的构造和颗粒质量的区别能力，细胞粗颗粒的光散射要比细颗粒强。 3??阻抗与射频法 通过四个不同检测系统完成： （1）嗜酸性粒细胞检测系统：特殊的pH的溶血剂溶解或萎缩除嗜酸性粒细胞以外的所有细胞。 （2）嗜碱性粒细胞检测系统： （3）淋巴、单核、粒细胞的检测系统： (4）幼稚细胞检测系统： 四 多角度偏振光散射法术 四个角度测定散射光的密度： ①0°：前角光散射粗略地测定细胞大小； ②10°：狭角光散射测细胞结构及其复杂性； ③90°：垂直光散射主要对细胞内部颗粒和细胞成份进行测量； ④90°：90°消偏振光散射（70°～110°） 从这四个角度同时对每个白细胞进行测量，将白细胞分为嗜酸粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。 血细胞计数 熟悉计数室 血细胞计数板系一长方形厚玻片，常用的改良牛氏(Improved-Neubauer) 计数板在中央横沟的两边各有一计数室，两计数室结构完全相同。计数室较两边的盖玻片支柱低0.1毫米。因此，放上盖玻片时，计数板与其间距即计数室空间的高为0.1毫米。 (见图)在低倍显微镜下可见计数室被双线划分成９个边长为１毫米的大方格。四角的大方格又各分为１６个中方格，这是用来计数白细胞的。中央大方格被划分为２５个中方格，每一中方格又划分成１６个小方格。中央大方格的四角及其中心５个中方格为红细胞或血小板计数范围。(见图) 采用“由上至下，由左至右，顺序如弓”的顺序，对压边线细胞采取“数上不数下，数左不数右”的原则 计数池充液时应注意的问题 1.不可断续充液， 2.充液量要适中， 3.充液完成后不可挪动盖玻片。 一 、红细胞计数 操作步骤 1 稀释液的配制：NaCL1.0g、Na2SO4·10H2O5.0g、HgCL20.5g以蒸馏水稀释到200ml。溶解后加伊红水溶液1滴，过滤后用。 2 取小试管1支，加红细胞稀释液2.0ml。 3 用清洁干净微量吸管吸取末稍血10ul。 4 擦去管尖外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻吸上层清液喇洗吸管2-3次，然后立即混匀。 5 充池后待2-3min，用高倍镜依次计数中央大方格四角和正中共5个中方格内的红细胞，按数上不数下，数左不数右的原则进行目视计数。 6 计算：红细胞数/L＝5个中方格内红细胞数×5×10×201×106