sars冠状病s蛋白抗原表位分析与定位研究.pdfVIP

摘要 acute 严重急性砰吸综合症(Severe respiratory 软件系统分析SARS病毒结构蛋白s、M、N蛋白，预测了12个抗原表位，用这些预测表位芹列设 和Ahol位点间，构建成融合袭达质粒，转化宿主蘸BL21经1PTG诱导后嵌合基因表达产物为可溶 性蛋白。经免疫印迹试验表明嵌合基囡表达产物可被SARS康复患者斑清所识别，表明重组融合蛋 白具有免疫反虚性．提示预{曼0表位中含有SARS-CoV结构蛋自的抗原表协。用纯化的重组融合蛋白 和单克隆抗体D3C5反应，GST-S2可以和单抗D3DI反应。Westernblot分析表明两个单抗所识别 799氨基酸残基。D3DI袭位(44-458)正位于s蛋白与受体结合的结构域中。 2C5是一株SARS．CoVS蛋白特异的有中和活性的单克隆抗体。以2C5为筛选靶分子，筛选噬 菌体展示随机7肚库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10 个ELISA OD值大干0．2的阳性嘴菌体克隆中，有8个噬菌体克隆展示有共同的7肽序列TPEQQFT， 展示有该序列的嘴菌体克隆能竞争抑制SARS．Co