5个现代月季品愈伤组织再生体系的建立与体细胞培养的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 现代月季是世界上最重要的观赏植物之一，其四季常开、香味浓郁、花色丰富，一直 为众人所青睐，具有广泛的应用价值，是现代城市绿化中不可替代的材料。我国北方由于 气候原冈，缺乏可以广泛栽培并能露地越冬的现代月季品种。 当前在月季育种中存在的突出问题是现代月季遗传背景狭窄，传统育种方法周期过长， 而且染色体数目及倍性差异造成远缘杂交不亲和与杂种的高度不育。生物工程则为生物品 种的改造开辟了新途径。愈伤组织和体细胞是无性系变异和遗传转化的良好的受体材料， 通过愈伤组织再生和体细胞培养可以获得无性系变异植株，而且体细胞融合为解决远缘杂 交不育提供了一个很有潜力的新途径。但是现代月季再生途径的建立还存在很大的困难， 而且体细胞培养难度很大，体细胞培养获得再生植株的报道还很有限，因此本研究对促进 月季的抗寒育种及其他性状的改良都具有重要的意义。 本研究通过探究影响现代月季快速繁殖和愈伤组织诱导再生的因素，并利用获得的愈 伤组织建立细胞悬浮系，探讨了影响现代月季体细胞培养的各种因子，旨在建立起现代月 季高效的快速繁殖体系、愈伤组织再生和体细胞培养技术体系，为以后导入抗寒等目的基 因、体细胞无性系变异的筛选及原生质体培养和融合等遗传操作打下良好的基础。本研究 的主要结果如下： 1．建立了5个现代月季品种快速繁殖体系：l号月季品种不定芽萌发和增殖的最佳培 5个月季品种无菌苗的最适生根培养基为：1／2MS+NAA0．05 mg·Lq和1／2MS+NAA 0．1mg·L～，生根率都可达80％以上：各品种无菌苗通过驯化炼苗，露地栽植成活率都可达 88％以上。 2．筛选出5个现代月季品种愈伤组织诱导最佳培养基。l号、8号月季品种叶片诱导 愈伤组织的最佳培养基为MS+2，4．D3．0 mg·L～。诱导率均可达到100．00％；2号、6号、9 号月季品种叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2，4．D2．0 mg·Ld+6．BA0．5mg·L～，诱导 率分别可达到97．67％、98．67％、100．00％。l号、6号月季品种幼茎诱导愈伤组织的最佳培 养基为MS+2，4．D3．0 mg·L一，诱导率分别可达到78．67％，84．33％；2号月季品种幼茎诱导 愈伤组织的最佳培养基为MS+2，4．D2．0 mg·L一，诱导率可达到73．67％：8号、9号月季品种 82．33％、80．33％。 3．筛选出4个现代月季品种愈伤组织分化最佳培养基。1号品种叶片愈伤组织分化的 最佳培养基为MS+2，4．DO．2 mg·L～+TDZ9．0mg·L一+GA30．1mg·L一，分化途径为不定芽发生 途径，分化率可达18．00％；6号品种叶片愈伤组织分化的培养基为MS+6一BA0．1 mg·L吐 +2，4．DI．0 mg·L一+TDZ8．0mg·L-I+GA30．1mg·L～，分化途径为不定芽发生途径，分化率可达 22．00％；适合8号品种叶片愈伤组织分化的培养基为1／2MS+6．BA0．5 mg·L．1+TDZl0．0 东北农业人学农学硕L学位论文 mg·L～+GA30．1mg·L一、MS+2，4．Do．2mg·L．1+TDZ9．0mg·L一+GA30．1mg·L-I，前者愈伤组织 分化途径为胚状体途径，胚状体通过继代培养可形成再生植株，后者分化途径为不定芽途 径，分化率分别为18．67％、21．33％，幼茎愈伤组织分化的最佳培养基为MS+TDZ8．0 mg·L一， 分化途径为不定芽发生途径，分化率可达46．67％：9号品种