动物源大肠杆菌药性与ⅰ型整合酶基因的研究.pdf

摘要 大肠杆菌是医学和兽医临床上最常见的病原菌之一，给人类的健康和畜牧业的发展造成 了严重的损害。抗菌药在控制大肠杆菌感染方面发挥了重要作用，但随着抗菌药物的广泛应 H{I，导致火肠杆菌耐药株尤其是多重耐药菌株不断出现，大肠杆菌的耐药问题已成为影响人 类健康和养殖业发展的重要因素。细菌耐药机制——整合子(in吨卿)系统得到研究者们的 广泛注意，并取得了很大的进展。细菌通过整合子系统，通过整合酶的作用，捕获外来的耐 药基因，并在位于整合子上游的启动子作用下得到表达，使细菌具有耐药及多重耐药性，造 成细菌多重耐药性的传播。在整合子介导细菌的耐药机制中，第一类整合子起着非常重要的 作圳。大部分的耐药基因水平传播都是由I类整合子介导的。因此调查研究大肠杆菌耐药性、 扩增I整合酶基冈检测I型整合子分子流行病学对从基因水平上探讨细菌耐药性转移的分子 机制具有重要的理论和实践意义。 我们从黑龙江地区某养猪场分离出20株大肠杆菌，某鸡厂分离20株火肠杆菌，分析大 C 肠杆菌对14种抗生素的耐药特点。采用PR方法检测整合酶基因intI．并对整合酶基因 测序和序列分析。研究养殖场大肠杆菌I型整合子分子流行病学特点。 J4种抗菌药物的药敏试验结果表明：40株火肠杆茵均表现多重耐药，对新霉索、氯霉素 100％耐药；对庆人霉素、链霉素、洛美沙星、诺氟沙星平¨阿奠两林的耐药翠超过90％，对 }那霉索、壮观霉素、恩诺沙旱、环丙沙星耐药率也较高，对头孢氮苄和呋哺唑酮相对其它 整合酶基因片断，大小约为280bp，与预计结果相符，动物源性大肠杆菌中I型整合子流行 较普遍．捡出率为55％，其中鸡源大肠杆菌I型整合子检出率较离为65％，猪源检出率为 50％。 结果表明所分离丈肠杆菌对抗菌药存在严重的耐药性，耐药谱不断增加，其耐药性亦不 断发生变迁。采用PcR方法成功克隆整台酶基因片断，并采用整台酶PCR方法检测大肠杆菌 I型整合子流行病学特点及大肠杆菌中intI基因．本研究结果为人肠杆菌耐药性监测提供 了一种实用、快速、准确的检测方法。 关键词：大肠杆菌抗生素耐药基因整合子整合酶 V ANDINT STUDIES0NRESISTANCE GENE0FES FROMANIMAL ISOLATED ABSTRACT is ofthemostcommon inthe and Escherichiacolione medicine pathogens veterinarysurgeon and the humans．Antimicrobial rolein industry clinically．endangerpoultry playsveryimportant diseasescausedEscheriehiacolt withthe useof controlling by Escherichiacoli，alongwidely antibiotics to is ofbacterial antibiticresistancebacteria worse，the resistanceis getting problem