共表达禽流感病ha5和ha9基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究.pdfVIP

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2016-03-02 发布于贵州
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共表达禽流感病ha5和ha9基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究.pdf

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共表达禽流感病ha5和ha9基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究

摘要本试验李句建了禽滤感HA5释鞋A9基鞭共表达禽痘疯毒转移载体，经转染、蓝亵克隆、筛选和纯化，获得了遗传形状稳定的HA基因重组禽痘瘸毒。提取感染重组病毒的鸡胚成鸡IgG为二抗进行群estern 蛋白。 H5亚型用该重组病毒进行鸡翅剃静免疫60日龄SPF鸡，免疫3周后，每只鸡用50xLD H9亚型LPAIV攻毒， HPAIV攻毒，H5免疫组无一发病和死，攻毒保护率100％；H9组用50xLD 攻毒保护率20％；对照组全部发病并在攻毒后3屿天相继死亡，发病率和死亡率均为loo％。 H5抗体效价检测结果表明重缀病毒免疫组鸡在免疫后7大即可检测到高效价的H15抗体，抗体效价在免疫后14天达到高峰，随后在较高水平上缓慢下降，攻毒对抗体效价及其变病毒疫萤能会垂诱导机体的细胞免疫程体夜免疫反应，对H5强毒攻击产生强的免疫保护，为进一步开展疫苗研究奠定科学的理论和实验基础。关键逯：禽流感瘾毒禽痘病毒珏A基因重组禽痘病毒 ABST弛≮CT h1也is akindofVacdne i11chjckens， stlldy，t0produce i11cludingcrossl脚tection recomb谴ant aild co—e牮璐s她HA9gcne fow珞oxvinls(rFPv)express啦HA5 onCEF was批眦sfectod constmct．Aftercon曲nlctionof位msf矗vector，it and ofb}ue vims F—017．Fouowingcio姐ingpl】re矗ca矗0n plaque，吐1epureHA-foWlpox were dideIl_ti五ed and recombinants alysis obtained，an byrestriction∞zymean sultsshowedtha劬erecoⅡ1_binantvimsconta试edHA ofAⅣandhad也estable fbwlpox gcno show。拙a蚀erecombinant sIlltofWest锄-blOt g镪eticprop酬es．There me ofAIv e伍cienny． expr鼯sedhemag曲撕Din西ycoprotein SPFc毯cke珏swere洳Ⅱ黼妇e越d threeweekslat旺Af妇 Si毋d∞卜电ld cha王l托ged HPAⅣisolate ddckells dlic