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口蹄疫的rt-cr检测及免疫抗体监测
摘 要
口蹄疫(Foot-and-mouth
disease
virus,FMDv)引起的偶蹄动物的一种急性高度接触性传染性疫病,被国
际兽疫局列为A类动物传染病之首。通过交叉保护试验和血清学试验确定FMDV
清亚型,血清型之间无交叉和交叉免疫现象。O、A、C型FMDV的毒力和抗原
性均易发生变异,几乎遍布亚、非、拉、欧各洲;SATI、SAT2、SAT3主要分布
在非洲,Asial型主要分布在亚洲,及中国的云南、新疆等。由于口蹄疫(FMD)
是世界范围内危害最严重的烈性传染病,并且口蹄疫血清型多,变异株多,分部
广,传播速度快,要求防制体系具有快速正确的反应能力,疫情监测系统是决定
反应快慢及正确与否的关键,而诊断方法是监测系统的技术依托,准确可靠的诊
断结果是制定正确防制措施的依据。
本研究对昆明地区0型FMDV流行状况进行了调查,结合昆明地区口蹄疫
诊断检测及防治过程中存在的主要问题,参考已发表的口蹄疫有关序列,有针对
性地设计了口蹄疫群特异性引物和型特异性引物,并与OIE指定的口蹄疫
AC.ELISA检测方法进行了比较。对标准毒株、野毒株及l晦床中疑似口蹄疫病料
准毒株和野毒株都能扩增出特异的目的基因片段;型特异性引物PIDl/P281、
PlD2/P2BI可对这两型的病毒进行快速分型,结果与AC.ELISA检测结果相符,
以此构建的口蹄疫RT-PCR技术是口蹄疫的一种快速、准确、灵敏、特异地检测
方法。
根据诊断结果,对口蹄疫疫区的动物用不同厂家疫苗进行免疫,并用正向间
接血凝进行抗体监测,监测结果表明:各个厂家不同批次的疫苗免疫后,抗体水
平差异不显著;而在不同动物之间的抗体水平比较发现,牛高于羊、羊高于猪。
免疫后60天后,抗体水平开始下降,说明目前使用的口蹄免疫苗免疫保护期短,
二次免疫的抗体水平好于一次免疫的,浓缩苗优于普通苗;猪口蹄疫灭活苗与猪
瘟猪肺疫二联同时使用,不影响口蹄疫免疫效果。此结果为口蹄疫的免疫程序制
定提供了重要依据。
关键词:口蹄疫;RT-PCR试验;正向间接血凝试验;抗体监测
DiseaseRT-PCR
DetectionofFootMouth by
andImmune surveillaqce
Antibody
lSummaryl
Foot-and-mouthDiseasethatis diseasevirusisakind
arousedfoot-and-mouth of
by high
andSAT3)
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