外源基因在转基杨树世代传递间遗传及表达规律研究.pdf

摘要 本试验选用具有不同抗虫性的转双抗虫基因(研和爿脚741杨株系为母本，用具有 优良特性的白杨无性系84K杨为父本，进行有性杂交，获得杂种后代家系。以不同 杂种家系为材料，对外源基因(标已基因．№m和BtC叫脚c基因)的遗传和表达及 外源基因问的相互关系进行研究。探索外源基因遗传和表达的规律性与稳定性，外源 基因问在遗传和表达上的相互关系，为转基因杨树的利用和杂交育种提供理论依据和 原始材料。取得的进展如下： 1．通过对741杨和毛白杨成龄大树进行5a结实性研究结果表明：74l杨果穗长度、 果穗粗度、果穗数量、每个果穗蒴果数均显著低于毛白杨的。毛白杨果穗在成熟开裂 少了外源基因飘移的可能性。 转基因741杨较难获得种子，其原因主要是杂种胚发育到3周以后停止发育并消 失，导致果穗结实率低，且大部分果穗成熟前脱落。因此采用胚挽救是克服杂交不育 的一种有效的方法。通过试验确定较适杂种苗幼胚培养的培养基为 Ms+6-BAO．1m∥L。 程，一般通过嫩茎小植株在50m∥LKaIl生根状况，即可初步断定杂交后代中是否含 有新霉素磷酸转移酶基因帅fII。5个杂交组合产生的后代中选取41个生长势较好的 杂种单株进行了Kan生根筛选，试验结果表明：所选41个单株不符合一对等位基因的 孟德尔分离规律；同理在杂交组合PBl×84K中产生的后代中，符合一对等位基因的 孟德尔分离规律；在PB6×84K中产生的后代中，不符合一对等位基因的孟德尔分离 规律，由于其余3个杂交组合群体较小没有进一步验证。由于本试验总的群体较小， 试验的准确性有待进一步验证。 3．本试验以转双抗虫基因74l杨的5个株系为母本，未转基因的84K为父本， 基因的表达及遗传。结果表明：检测的杂交FI代单株中，外源基因Btc砂，一c分离 比例为1．70：l，经F测验不符合一对等位基因的孟德尔分离规律；在转基因株系 PBl杂交FI代中分离比例为1：1，经F测验符合一对等位基因的孟德尔分离规律； 在转基因株系PB6杂交Fl代中分离比例为2．43：l，经∥测验不符合一对等位基因 的孟德尔分离规律。 为1．92：l，经F测验不符合一对等位基因的孟德尔分离规律；在转基因株系PBl 杂交Fl代中分离比例为1：1，经岩测验符合一对等位基因的孟德尔分离规律；在转 的分离，经r测验符合3：1的分离。 代中发生分离，交换率为2．7％。 本研究为转基因杨树的遗传改良方面的应用提供一定的参考依据，也为转基因 74l杨的应用和推广提供一定的理论依据。 关键词：有性杂交；转基因杨树；外源基因；遗传；表达 Studieson and of Genes theInherjtance ExpressionFbreign Generationin in‘I’ransmissionof 1[1ransgenicPoplar Author：DuJua“ Major：Fore8theredj母andbr。eding Supervisor：ProfYangMin—shcng Abstract intllis the c10nes Sexual wasstudied hyb瑚ization a币cle，choosingwhi把Poplar and whichhaddiff打eIlt transfornledtwoinsect·resistant APD geIles∞r and84K hadchoicenessch盯∞tcrasmale the had