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- 2016-03-02 发布于贵州
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小黑杨(poplussimonii
摘要
simoniiXP
本研究以小黑杨(Populus nigra)花粉植株为试材,采用根癌农杆菌介导
碱,甘氨酸甜菜碱是一种重要的调渗物质,盐胁迫下,甘氨酸甜菜碱的积累可以保护细胞
内蛋白质的结构和功能,降低细胞水势,从而增强植物自身的耐盐能力。探讨了影响植物
NaCl盐胁迫条件下,转基因植株的耐盐能力比对照植株有所提高。研究结果如下:
(1)确定了筛选小黑杨花粉植株转化体选择压为卡那霉素,其浓度为40rag·L~。
(2)测试了三种头孢类抗生素有效的抑菌浓度及对小黑杨花粉植株叶片分化的影响。
确定使用上海制药四厂和哈尔滨制药总厂生产的头孢唑林钠为脱菌抗生素,使用浓度为
700mg·L~。
(3)建立了以小黑杨花粉植株叶片为外植体的转化体系:
预培养:在分化培养基(MH+6.BA
0.5mg-L~+NAA0.05
中预培养2d;
侵染:用OD600为0.1的工程菌液进行侵染,时间为3~5min:
共培养:在分化培养基上置暗处共培养2~3d:
5
选择培养:置选择脱菌培养
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