小鼠桑椹胚和早囊胚玻璃化冷冻保存技术的研究.pdfVIP

摘 要 本研究分别使用细管法和OPS法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚和囊胚，并使用含有0．5M TCMl99培养液培养24h或将解冻后的胚胎移植入受体子宫，观察了胚胎的解冻后体 外发育能力和移植后受体妊娠率和产仔率，以此讨论小鼠桑椹胚和囊胚玻璃化冷冻的 最佳方法和发育阶段。试验结果表明： 培养24h，桑椹胚的囊胚化率为70．59％，而囊胚则仅有41．94％在解冻后继续发育。胚 解冻后桑椹胚经24h培养后囊胚化率为81．13％。极显著高于囊胚的扩张率 囊胚的扩张率分别为75．00％，45．oo％。 2、胚胎移植入受体后，桑椹胚鲜胚和两步法冷冻桑椹胚的妊娠率分别为42．86％ 1．Omin，无论桑椹胚还是囊胚移植后均未获得妊娠受体。两步法冷冻，胚胎先在EFS20 (11．11脚显著高于一步法(14．29％，3．800劬(PO．05)。 3、一步法处理桑椹胚，胚胎在EFS40中平衡O．5rain，经24h培养后囊胚化率为 72．31％，显著高于在EFS40中平衡1．0 衡O．5 (Po．01)。 4、一步OPS法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚获得了96．83％的囊胚化率，与一步细管 OPS法玻璃化冷冻小鼠囊胚体外培养24h后扩张率达到71．15％，显著高于两步细管 法口如．05)。两步OPS法和两步细管法冷冻小鼠桑椹胚，囊胚化