抗原捕获反转录合酶链式反应（ac-rtpcr）检测口蹄疫病毒方法的建立.pdf

摘 要 PEG．6000沉淀、差速离心和蔗糖密度梯度离心等方法提纯FMDV 146S，免疫动物，制 备抗血清：通过饱和硫酸铵粗提、sephadex G．25除盐、DEAE一纤维素柱层析等提取IgG， reverse chain capture 式反应(Antigen transcriptase／polymerase 断方法。经抗体包被效果、抗原捕获效果、抗体包被管存放期、敏感性和特异性、田叫 抗体包被效果和捕获抗原效果；抗体包被管放置室温过夜或放置室温1月后仍具有捕获 性高于常规RT／PCR，并可对口蹄疫病毒直接定型。本试验采用一步RT／PCR方法，全 部反应在同一个Eppendorf管中进行，减少了操作过程中的污染，简化了试验程序，适 宜于口蹄疫大批量样品的检测。 关键词：FMDV；AC．RT／PCR：包被抗体；捕获抗原 an