杨树多基因遗传化及外源基因表达研究.pdfVIP

摘要 以转抗虫基因741杨为受体，进一步转化了发根农杆菌砌质粒T—D悄A，获得 了转多基因741杨株系，通过转多基因植株生根特性、形态变异、叶片Bt毒蛋白含 量、激素含量及抗虫性分析，初步筛选出了抗虫易扦插转基因741杨株系；探讨了外 胁迫对外源基因表达的影响。在此基础上，将由m质粒上克隆出的rolls、rolC基因 分别转入了普通741杨，用于研究roIC和roIB基因的功能及在转基因植物中 的表现，筛选易生根转基因株系．主要研究结果如下： 因和m质粒T—DNA)株系田间苗为材料，研究了转多基因741杨田间的生长特性， 观察741杨叶片形状大小、叶片重、叶柄长短．结果表明，转多基因741杨和未转发 根农杆菌的植株叶片相比，叶片形状变的短而宽，但单位重量变化不大，4种内源激 素含量均增加2倍以上． 2．采用EusA技术，对转多基因741杨田间植株叶片上的m毒蛋白进行测定， 并在室温下做了饲虫试验。结果表明，转多基因741杨叶片上矾毒蛋白含量均小于 舟蛾的致死率降低，但对幼虫的生长发育仍有明显的滞育作用，影响了杨扇舟蛾生命 周期正常的完成，对美国白蛾的致死率仍是100％，这说明外源基因发根农杆菌m 质粒T-DNA的转入，抑制了Bt基因的表达． 3．以转抗虫基因