欧美杨108号蜘蛛杀虫肽+bt毒蛋白嵌合基因研究.pdf

目录 摘要 杨树是世界上中纬度地区广泛栽培的重要速生用材树种，但是杨树的虫害种类多， 危害十分严重，尤其是大面积的杨树人工林。而杨树抗虫基因工程为解决这个难题提供 为外植体材料，利用农杆菌介导法成功地将抗虫基因(蜘蛛杀虫肽+Bt毒蛋白的嵌合基 因)导入该受体中。通过试验得出以下结论： (1)通过除菌抗生素的筛选试验，可以看出在7种抗生素中以注射用头孢唑啉钠抑菌效 果最佳，因此，试验所选用的除菌抗生素为注射用头孢唑啉钠； (2)根据叶片对头孢唑啉钠的敏感试验，最终确定除菌时，头孢唑啉钠的浓度为 t’ 1000m∥L； (3)叶片的敏感试验结果表明，在筛选转化体时，卡那霉素的临界浓度确定为 30m∥L； (4)通过生根敏感试验，最终确定选择生根培养基卡那霉索的临界浓度为20m∥L； (5)成功建立欧美杨108号的遗传转化程序：菌株活化一叶片预培养2～3d一液体菌株 菌，卡那霉素30m∥L筛选一脱菌、筛选数次一获得卡那霉素抗性芽一一个月后， 一获得卡那霉素抗性植株； (6)试验侵染转化95个叶盘共1713个叶片，获得卡那霉素抗性芽8个，转化率为 4．67％o： (7)经PCR检测，凝胶电泳结果显示，8个卡那