大青杨遗传转化系的建立及其lbdreb基因的遗传转化.pdfVIP

摘要 lIIII I I III IIIIIIl rl l III。 摘要 大青杨是我国东北林区特有的乡土树种，生长快、材质优良，是造纸及胶合板材极 好的原料。但由于目前东北林区无或极少皆伐迹地，多为土壤干旱瘠薄、地力衰退严重 的退耕还林地，急需大量耐旱、抗寒、速生、优质的大青杨新品系。本研究以大青杨为 材料，进行外植体选择、基本培养基选择、分化培养基和生根培养基配方筛选，建立大 青杨遗传转化体系；采用根癌农杆菌介导法，将抗旱基因二色补血草LbDREB转入大青 杨中，并进行分子检测及耐旱、 耐寒能力测试研究，主要实验结果如下： l、建立大青杨的遗传转化体系：外植体取材部位为苗高为50cm左右苗木的第二 l‘16-BA+0．1 茎节，分化培养基为1／2MS+0．5 l—NAA，生根培养基为1／2MS； mg mg 转基因大青杨受体材料为大青杨形态学上端的第三片叶子和形态学上端三个茎节。 2、通过卡纳霉素浓度梯度试验确立叶片分化对卡那霉素的临界浓度为50 l～； mg 以大青杨组培苗叶片为受体材料，通过农杆菌介导法导入LbDREB基因，转化率为 生，而阴性对照没有任何扩增条带，初步证明了LbDREB基因己被导入到大青杨基因组 转录水平上表达；形态学观察表明，RT-PCR检测阳性的植株都有矮化现象，其他植株 的没有矮化现象。 3、用转基因叶片，茎节、根在分化培养基上培养进行扩繁试验，发现根系较转基 检测，发现转基因植株必须通过多次分化筛选之后才可以以微繁的方式增殖；但是茎段 中腋芽发育出来的子代，能够保持其基因型不变，增殖系数较低，2．9--3．5之间；石蜡 切片表明多细胞共同发育成芽，最先得到的芽为嵌合体。 LbDREB基因植株抗冻性、耐盐、耐碱均强于对照植株。 5、不给水胁迫、15％PEG胁迫、甘露醇胁迫下研究叶绿素及荧光参数测定发现： 矮化植株E3号转基因植株叶绿素含量低于野生型和不矮化Al号转基因植株。荧光参 高于野生型。所以在胁迫状态下E3号转基因植株抗光氧化能力高于野生型和Al号转 基因植株。 关键词大青杨；三M糍口；遗传转化；转基因苗木扩繁；抗逆性 Abstract · _II Abstract of in ussuriensisKom．isthe tree northeastChina、析mfast Populus indigenousspecies for andmateriallisthe materials and growth fine，it extremelygood papermakingplywood．At little land forest doesnothaveor cut-over land，the present,Northeastregion extremely planted arethe returnedto which