春兰的组织培养遗传转化的初步研究.pdfVIP

摘 要 Sw．)，多年生常绿草本植 我国习见栽培的地生兰花，皆为兰属(Cymbidium 物；兰属约四十种，主要分布亚洲热带和亚热带地区，少数分布大洋洲和非洲。 我国有20种及其变种，是本属的分布中心。兰花是我国的传统名花，是著名的 珍贵盆花，因此，对国兰进行组织培养、遗传转化的研究具有重要的意义。 Rchb．￡)为试材，系统地研究了离体培 本试验以春兰(Cymbidiumgoeringii 养中各种影响因子对类原球茎和芽的增殖、生长、生根以及长期培养后生长势恢 复的影响；同时，对农杆菌介导的春兰转基因进行了初步研究。主要研究结果如 下： (1)在春兰类原球茎途径的研究过程中，利用春兰根状茎的茎段及嫩芽， 在添加了5．0mg／LNAA的MS基本培养基上，成功诱导获得了绿色的质地优良的 0．1 类原球茎；并进一步探索了类原球茎增殖的最佳生长调节剂浓度为BA mg／L； 在对不同有机添加物的对比试验中发现，酵母添加物和蛋白胨对类原球茎鲜重的 增加和增殖效果均较佳，其中以1．0g／L的蛋白胨最佳。 (2)在芽途径的组织培养研究中，优化NAA浓度(5．0 mg／L)，诱导丛生芽 的产生，提高了芽的增殖率；同时发现，影响生长势减弱的春兰生根的关键因素 是芽的高度；当然，适宜浓度的蔗糖(20 g／L)也是春兰生根所必需的。 (3)通过对类原球茎和生长势减弱材料芽增殖的研究发现，鲜重增加率／ 增殖率(F／P值)是衡量类原球茎或芽正常生长与否的一个重要指标。类原球茎 的F／P值兰0．6时，类原球茎生长健壮，色泽深绿；而F／P值0．6时，类原球 茎生长偏弱，色泽黄绿，部分黄化。而芽增殖的适宜的F／P值在1．12左右。F／P 值的提出使春兰生长势的强弱实现量化。 (4)初步建立了一套适合于春兰的遗传转化体系，转化材料通过了GUS染 色和PCR检测，说明gvs基因已经整合到春兰的基因组中。 Rchb．￡)；(类)原球茎；有机添加物； 关键词：春兰(Cymbidiumgoeringii 再生体系；农杆菌介导的转基因 ABSTRACT The cultivatedorchidsinChina to areall widely belongCymbidium，and and herbaceous are 40 in perennialevergreen plants．Thereapproximatespecies the ale distributedin and areasof Cymbidium，whichmainly tropicsubtropicAsia， andsomeinOceaniaandAfrica．Chinahas20 andmutations．Orchidisoneof species China’Straditionalandfamous is for on flowers，So，it precious greatpotentialstudy orchid．