红锥优良系isr遗传结构分析.pdfVIP

摘 要 本研究以广西大青山实验林场的红锥为研究对象，运用ISSR分子标记技术 对红锥进行遗传多样性和遗传结构的分析。研究结果及方法如下： l、利用改良的CTAB法提取红锥基因组DNA，以此方法提取出的DNA纯 度及含量都较高，经检测可以用于ISSR-PCR扩增反应。 2、建立了适合于红锥的ISSR．PCR反应体系，最佳反应体系为：在20此的 体系中各反应物用量为：2．09L10×Buffer、1．41tLM82+、O．3此dNTP、0．8皿引物、 0．29L 变性30s，52～55℃(根据引物的不同其退火温度也会变化)退火45s，72(2延 伸2min，共循环40次，最后一个循环结束后，72℃延伸7min，4。C保存。 3、利用ISSR技术对广西大青山实验林场5个种源区的红锥遗传多样性进 行分析。选用了ll条ISSR引物，共扩增出多态性位点168个，多态位点百分比 为100％，不同种源区的多态位点百分比在94．64％--一99．40％之间。其中博白种源 区的多态位点百分比最高，高达99．40％，说明其种源内遗传变异水平是五个种 源区中最高的，总的Nei’S遗传多样性指数为0．3697，总Shannon信息指数为 0．550。各种源区的遗传相似