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F在脱髓鞘疾病中的功能意义 cystatin 硕士生姓名： 李 宁 指导教师： 马坚妹教授 指导小组： 范凯副教授 专业名称： 人体解剖与组织胚胎学 摘要 目的：研究II型半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatinF对中枢神经系统脱髓鞘疾 病的影响及其作用机制。 方法：利用C5786／129 F基因敲除小鼠及其野生型同窝仔通过O．2％ cystatin cuprizone饲育建立中枢神经系统髓鞘脱失模型，正常C5786小鼠作为空白对照。 采用蛋白脂蛋白(PLP)免疫组化和BlackGold髓鞘染色方法，通过髓鞘残留面 积比对基因敲除小鼠胼胝体内髓鞘脱失情况与野生型同窝仔小鼠进行对比研究。 通过免疫组化和原位杂交方法分别对cuprizone饲育4周和2周后模型胼胝体内 C的 小胶质细胞／巨噬细胞系细胞的集聚及cystatinF抑制的目标酶cathepsin 表达情况进行分析，借以了解cystatinF影响髓鞘脱失的机制。 结果：1．通过萌鞘残留面积比的分析发现cuprizone饲育4周后，基因敲除 ‘ 小鼠和野生型同窝仔的髓鞘残留面积比均显著低于空白对照小鼠；基因敲除小鼠 髓鞘脱失J隋况显著高于野生型同窝仔。 2．cuprizone饲育4周后，基因敲除小鼠胼胝体内小胶质细胞／巨噬细胞系细胞 数量显著高于野生型同窝仔；同时cathepsinC的表达也显著高于野生型同窝仔。 3．cuprizone饲育2周后，基因敲除小鼠和野生型同窝仔的髓鞘残留面积比虽 低于空白对照小鼠，但无显著性差异。 4．cuprizone饲育2周后，基因敲除小鼠与其野生型同窝仔相比胼胝体内小胶 in 质细胞／巨噬细胞系细胞数量和cathepsC的表达均无显著性差异。 结论：1．oystatinF基因敲除加重cuprizone诱导的髓鞘脱失。 C高表达所导致的小胶质细胞／巨噬细胞系细胞集聚是 2．由cathepsin cystatinF基因缺乏导致脱髓程度加重的可能原因。 3．cystatinF基因敲除不影响少突胶质细胞对cuprizone毒性的敏感性。 C表达。 F基因缺乏并不直接影响cathepsin 4．cystatin C，小胶质细胞 关键词：cystatinF，脱髓鞘，cuprizone，cathepsin The FunctionRoleOf FIn Disease CystatinDernyelination Master candidate：Li degree Ning MaJianmei Supervisor：Professor ProfessorFanKai Vice—supervisor：Associate or：Human and and Maj anatomyHistology