hiv--1广中和抗体pgt135的结构和识别的抗原表位研究.pdfVIP

摘要 l呲叭㈣㈣帅㈧!!!I 摘要 人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency 内发展成为艾滋病。HIV-1极易在感染过程中发生突变，逃逸人体免疫系统的监控， 通过疫苗诱导HIV-1广谱中和抗体的产生是很困难的，因此设计保护性HIV-1疫苗 一直是人类的梦想。尽管抗病毒药物在治疗H1V-1方面取得了显著的成果，但目前 还没有疫苗能有效地预防和控制HIV-1感染。HIV-1自然感染过程中，会产生广谱 中和抗体，近年来分离的VRC01类抗体、PT系列和PGT系列抗体能中和目前世界 范围内流行的大多数毒株，尤其是VRC01类抗体能中和90％以上的世界流行株。 感染过中，广谱中和抗体产生相对比较滞后，因此不能有效地清除体内感染的HW-1 病毒。最近，人们通过结构生物学的方法，研究HIV-1广谱中和抗体与HIV-1膜蛋 HIV-1膜蛋白的保守性表位有了更加深入的了解。了解HIV-1广谱中和抗体以及这 些抗体所识别的抗原表位，有助于HIV-1疫苗的研究。我们可以根据HIV-1广谱中 和抗体的表位进行HIV-1疫苗的免疫原设计，同时也可以将HW-1广谱中和抗体用 于被动免疫。 进行密码子优化，在293T细胞中进行抗体的大量表达和纯化，对PGTl35进行晶 体结构解析；检测PGTl35抗体对HIV-1假病毒中国流行株的中和敏感性；用酵母 展示随机抗原片段库，筛选PGTl35抗体所识别的抗原表位；用酵母展示抗原随机 突变库，筛选PGTl35抗体所识别的抗原表位的重要氨基酸位点，用假病毒中和抑 chain variable， 别的抗原表位片段，通过筛选人类非免疫的单链抗体(singlefragments scFvs)酵母库，寻找与PGTl35抗体类似的HIV．1广谱中和抗体。 链有较长的互补决定Ix(complementaritydetermining 抗体识别隐蔽的糖基化位点有一定的帮助；PGTl35抗体对HIV-1中国流行株病毒 大多数有中和抑制作用；用酵母展示抗原随机突变库，筛选出PGTl35抗体的抗原 表位在HIV-1膜蛋白gpl20的V3 loop区和V4loop区之间；利用酵母表面展示抗 原随机突变库，筛选出PGTl35抗体所识别的重要氨基酸位点。用假病毒中和抑制 实验，验证了HIV-1膜蛋白上仅仅一个糖基化位点的改变，就可以改变抗体对HIV-1 摘要 的中和敏感性。用昆虫细胞表达的PGTl35识别的抗原表位，从人类未免疫的scFvs， 筛选出对PGTl35抗体表位的抗原片段有结合能力的抗体。 对HIV-1广谱中和抗体PGTl35晶体结构的解析以及它所识别的抗原表位研究， HIV-1疫苗的免疫原，也可以将PGTl35用于被动免疫中疫苗的设计。 关键词：HIV-1；广谱中和抗体；PGTl35表位； 疫苗 Abstract Abstract Human two HIV-1andHIV-2． ImmunodeficiencyVirus(HIV)has majortypes HIV infectionis causedHIV-1and largely by morethan oftheinfected ninetypercent will intoAIDSin10to20 persons Can develop