b7-h2基因’-utr内的单核苷酸多态性与胃癌发生相关性的研究.pdf

B7-H2 基因3’-UTR 内的单核苷酸多态性与胃癌发生相关性的研究 中文摘要 中文摘要 【目的】研究B7-H2 基因3’-UTR 内的单核苷酸多态性（SNP ）与胃癌发生的 相关性，并进一步探讨胃癌组织中B7-H2 表达下调的机制。 【方法】1.运用生物信息学软件筛选出位于B7-H2 基因3’-UTR 内的SNP 位 点及可能存在的miRNA 结合位点；选择位于预测的miRNA 结合位点内的，且较 小等位基因频率(MAF)大于10%的SNP 进行研究。2. 收集183 例胃癌患者及348 例正常人的外周血样本，采用聚合酶链式反应- 限制性片段长度分析法 （PCR-RFLP ）检测所收集的样本中该 SNP 的基因型分布，分析不同基因型与胃 癌发生及临床病理参数的关系。3.采用双荧光素酶报告基因系统分析所预测的 miRNA 对B7-H2 基因表达的调控作用，进一步探讨调控机制。 【结果】1. 从SNP 数据库中查找到40 个位于B7-H2 基因3′-UTR 的SNP 位 点；较小等位基因频率(MAF)大于10%的SNP 有rs15927 ，rs3804033 ，r， rs4819388 和r，其中rs4819388 位于miR-24 与B7-H2 基因3’-UTR 结合 区内，因此选取该SNP 进行研究。2. 数据分析显示SNP rs4819388 与胃癌的发生 密切相关。在胃癌患者中，GA 杂合子所占比例明显高于 GG 纯合子（55.7% vs 32.8%， OR = 1.60 ，95%CI = 1.08–2.37 ）；相对于GG 纯合子，基因型为AA 的个 体发生淋巴结转移的可能性显著增高(OR = 9.27，95%CI = 1.16–74.2，p = 0.017) ， 肿瘤细胞低分化的可能性更大 (OR = 8.16，95%CI = 0.98–67.8，p = 0.043) ，TNM 分期为III/IV 期的可能性更大(OR = 4.75，95%CI = 1.01–22.4 ，p = 0.046) ；A 等位 基因在发生淋巴结转移（OR = 1.76 ，95%CI =1.05-2.95 ，p=0.034 ）和/或TNM 分 期为III/IV 期（OR = 1.80 ，95%CI =1.07-3.04，p=0.032 ）的患者中的频率明显高于 G 等位基因。3. 双荧光素酶报告基因系统分析结果显示 miR-24 可通过与 B7-H2 的3’-UTR 结合而抑制其表达，且miR-24 的抑制性作用是通过rs4819388 产生的。 【结论】位于B7-H2 基因3’-UTR 内的SNP rs4819388，可影响miR-24 对B7-H2 表达的调控作用，与胃癌发生相关。 关键词：B7-H2 ；单核苷酸多态性；miR-24 ；胃癌 作 者：杨盼盼 指导老师：华 东 汪维鹏 I 英文摘要 B7-H2 基因3’-UTR 内的单核苷酸多态性与胃癌发生相关性的研究 Single nucleotide polymorphisms within B7-H2 gene 3-UTR and correlation with the risk of gastric cancer Abstract Objective: To investigate the correlation between the singl