hash1在肺经内分泌肿瘤中的表达及其临床意义.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要………………………………………………………………_…4 二、英文缩略词………………………………………………………………………8 三、论文 前言………………·………………··……………………………………………9刖吾………………”………………“…………………………“”……………。y 实验材料与方法………………………………………………………………10 实验结果………………………………………………………………………12 讨论………………………………··………………··………………………··15 结论……………···……………………………………………………………17 四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………18 五、参考文献………………………………………………………………………19 六、附录 综述………………………………··…………………………………·………21 在学期间科研成绩……………………………………………………………30 致谢………………………………··…………………………………………·31 个人简介………………………………………………………………………32 ·中文论著摘要· hASHl在肺神经内分泌肿瘤中的表达及其临床意义 刖 吾 hASHl(humanachaete—scute homolog 肺神经内分泌细胞的早期分化阶段，在终末分化标记物出现后其表达趋于沉默。 已有研究表明在具有神经内分泌分化的前列腺癌、甲状腺髓样癌、胃肠道神经内 分泌癌中有hASHl基因的表达。目前临床常用的非激素类神经内分泌肿瘤标志物 有嗜铬粒蛋白A(chromogranin 等。本实验通过免疫组织化学方法、Westernblot和RT-PCR方法检测正常肺组 织和各型肺肿瘤中hASHl基因的表达情况，分析其表达与神经内分泌标志物的相 关性，探讨其成为更为特异和敏感的临床病理诊断肺神经内分泌肿瘤的标志物的 可能性。 材料和方法 一、材料 收集166例肺癌组织蜡块(鳞癌30例，腺癌30例，大细胞癌20例，典型类 癌16例，非典型类癌20例，大细胞神经内分泌癌10例，小细胞癌40例)，其中 35例取自辽宁省肿瘤医院，其余取自中国医科大学附属一院，49例肺炎性假瘤及 10例癌旁正常肺组织蜡块取自中国医科大学附属一院。 23例肺癌新鲜组织标本(有相应的蜡块标本)，9例鳞癌，9例腺癌和5例小 细胞癌新鲜组织均取自中国医科大学附属一院2008年5月-2009年5月手术切除 标本。 二、主要试剂和来源 chromogranin 司。 三、方法 (一)免疫组织化学染色 蜡块标本切片后按照链菌素抗生物素蛋白一过氧化物酶免疫组化法(SP法) 检测，所有标本均检测hASHl(1：i00)蛋白，所有肺神经内分泌癌标本均检测CgA、 Syn和CD56的表达情况，以磷酸缓冲液PBS代替一抗作为阴性对照。 blot (二)Western 以切胶方式与hASHl蛋白所在部位分开转印。ECL显色，X线胶片曝光成像。 (三)RT—PCR 30s，30个循环后于720C延伸5min，最后经琼脂糖凝胶电泳后保存图像。 (四)统计学分析 应用SPSS17．0统计软件进行数据处理，对hASHl在各种肺组织中表达的差 异采用x 义。 结果 一、免疫组织化学结果 2 hASHl蛋白表达定位于细胞核，在正常肺组织、肺炎性假瘤、肺鳞癌、肺腺 癌和肺大细胞癌中不表达；在典型类癌中的表达阳性率为12．5％(2／16)，在非典 神经内分泌癌中的表达阳性率为60％(6／10)，在小细胞癌中的表达阳性率为77．5％ (3 者为阳性染色，CD56在细胞膜和细胞浆呈现棕黄色细小颗粒者为阳性染色，36例 阳性，在50例大细胞神经内分泌癌和小细胞癌中，2