kb细胞中spta5l1基因生物学功能的初步研究.pdf

人SPATA5L1 基因在肿瘤中的生物学功能的初步研究 中文摘要 中文摘要 背景及目的：通过基因芯片筛选研究和后续的免疫印迹验证实验发现，经过 2-8 Gy 电离辐射和/或适当剂量紫杉醇作用后，人口腔上皮癌KB 细胞的SPATA5L1 表达明显增高。在肿瘤细胞中该基因的功能目前尚未有任何报道。本课题旨在通 过构建该基因的过表达质粒并稳定转染KB 细胞，同时应用多种检测肿瘤细胞生物 学特点的实验方法，对 SPATA5L1 基因的功能进行初步探究，探讨肿瘤治疗后容 易转移和复发的可能分子机制，以寻找新的肿瘤诊断、治疗分子靶点。 方法：1、采用脂质体转染法将SPATA5L1 基因转入口腔癌细胞，经G418 筛 选，挑取阳性克隆; 用Real-time PCR 和Western blot 方法检测SPATA5L1 基因的 mRNA 表达和蛋白表达。 2 、将稳定转染SPATA5L1 基因的细胞作为实验组，转染空质粒的细胞作为对 照组，不转染的细胞作为空白组。采用CCK-8 法检测细胞的增殖活性；流式细胞 仪检测细胞周期分布和凋亡; Western blot 法检测细胞周期调控蛋白