ryrs在兔阴海绵体平滑肌细胞的表达及作用.pdfVIP

中文摘要 目的研究兔阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞的体外培养方法，兰尼碱受体(RyRs) 在CCSM细胞中的表达情况及在胞内[Ca”]。浓度调节中的作用。方法取雄性性成 ● 熟新西兰兔，取出阴茎海绵体，用组织块法进行细胞培养，差速贴壁法细胞纯化， 利用倒置显微镜观察、免疫荧光染色法鉴定细胞纯度；取3代以内CCSM细胞， 通过Genebank查出RyRscDNA序列，针对RyRs3种不同亚型的非同源部分 Premier 用Primer 5．0软件设计3对引物，以逆转录PCR(RT-PcR)方法分别检 3种亚型mRNA的表达，凝胶成像系统分析结果；取生长旺盛的CCSM 测RyRs NE激发，以激光扫描共聚 素(NE)激发，B组：50llmol／L普鲁卡因+10umol／L 焦显微镜观察胞内[Ca2+]。浓度变化。结果培养7d开始有细胞从组织块长出，