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真 菌 检 验 技 术 进行真菌检验的注意事项: 在生物安全柜中进行。 每天工作前后应对工作区域进行消毒。 不可试着闻气味。 不可对组织胞浆菌、球孢子菌进行玻片培养。 真菌检验技术 形态检验技术 培养技术 生化检查 免疫学检查 其他鉴定诊断试验 真菌形态检验技术 标本的采集和处理 毛发,皮屑,口腔黏膜,浓汁,痰,血液,粪便,尿液,阴道及宫颈分泌物 采集标本注意事项 标本来源适宜 用药前采集 量充足 无菌操作 立即送检 形态检验 直接镜检 真菌菌丝和孢子,可初步判断为真菌感染 形态学检验 染色镜检 革兰染色 乳酸酚棉兰染色 墨汁染色 荧光染色 糖原染色 培养技术 目前鉴定真菌的唯一方法 试管培养法 大培养法 小培养法 生长现象 生长速度:7~10 day; 3 week 菌落大小 表面形态 菌落性质 酵母型、酵母样型、丝状菌落 菌落颜色 菌落边缘 菌落底部 菌落形态---真菌鉴定依据 酵母型菌落 类酵母型菌落 丝状菌落 隐球菌菌落 酵母型菌落 酵母型菌落 C. albicans菌落(类酵母型) 真菌的其他鉴定方法 生化检查 糖类发酵试验 同化碳源试验 同化氮源试验 明胶液化试验 尿素分解试验 免疫学检查 皮肤试验 血清学测定 厚膜孢子形成试验 芽管形成试验 动物接种 病理组织检查 核酸检测 真菌毒素的检测 真菌药物敏感试验 常用药物 多烯类:两性霉素B 吡咯类:酮康唑 氟胞嘧啶 真菌药物敏感试验 试验前准备 培养基:RPMI 1640 待检菌液:0.5麦氏比浊标准 药物原液配制:10倍最高实验浓度 真菌药物敏感试验 常用方法 常量稀释法 微量稀释法——96孔板 质量控制:MIC落在预期值范围内 质控菌株: 近平滑念珠菌ATCC22019、克柔念珠菌ATCC6258 * * 病发镜检可见发内菌丝 足屑鳞屑镜检可见鳞屑细胞间有菌丝 单细胞 多细胞 曲霉属 青霉菌落 *
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