利用噬菌体肽库选survivin结合肽.pdfVIP

。 中 文 摘 要 目的将纯化的survivin蛋白作为诱饵，从噬菌体肽库中筛选出结合肽，针对Sur— vivin蛋白的小肽物质，可望成为一类新的I临床治疗肿瘤药物，同时也为蛋白质相互作用 的机理研究提供新的思路。方法用纯化的sun，i血蛋白包被35nlnl的塑料培养皿，加 满封阻液封闭后，耐缓冲液洗板，加入随机12肽的噬菌体肽库，除去未结合的噬菌 体，再用靶分子溶液竞争性洗脱结合的噬菌体，通过测定噬菌体滴度检测su九rivill蛋白 的吸附、富集效果，筛选阳性噬菌斑，制作DNA测序模板进行测序，据此推导结合随机多 肽的氨基酸序列。结果经3轮筛选，噬菌体显示有良好的富集效果。从第3轮筛选产物 中挑取8个蓝色噬菌斑(阳性克隆)进行测序，DNA测序结果表明，具有一致性序列GI— ANf师Fn KIS。结论从噬菌体随机肽库中，筛选到能与Survivin蛋白特异性结合的一 段短肽，为Survivin蛋白的进一步研究奠定基础。 关键词噬菌体肽库；筛选；Survivin；结合肽