抗乙酰胆碱受体链抗体与人血清白蛋白融合基因真核表达载体的构建与表达.pdfVIP

f1殳摘簦 抗乙酰胆碱受体单链抗体与人血清白蛋白 融合基因真核表达载体的构建与表达 搁 要 chainvariable 目的：构建真核表达体系．以提高抗人乙酰胆碱受体单链抗体(single serum fragment，ScFv)与人血清白蛋白(humanalbumin，HSA)融合基因的蛋白 术端加“A”后克隆到中问载体pMDl8—T 载体，酶切后的目的片段亚克隆至真核表达载体pPIC9K，构建重组载体 pPIC9K-ScFv637-HSA，并将其转化至E．coliDH5ct中，分离提纯重组载体后再经 酶切、琼脂糖凝胶电泳检查以确认融合基因的正确性。将电泳检查后确认jF确的 pPIC9K重组载体经过限制性核酸内切酶SalI线性化处理，之后电穿孔导入甲醇营 况。应用鼠抗c～myc单克隆抗体进行斑点杂交试验检查宿主菌中融合蛋白的表达。 结果：电泳检查发现了大小分别为