共培养技术用于外构建组织工程软骨的实验研究.pdfVIP

共培养技术用于体外构建组织工程软骨的实验研究 中文摘要 共培养技术用于体外构建组织工程软骨的实验研究 中文摘要 一、人骨髓间充质干细胞与人软骨细胞的分离培养 目的：探索人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells ， hBMSCs ）与人软骨细胞（human Articular Chontrocytes ，hACs ）的体外分离及培养过 程，并对其进行鉴定；尝试利用转化因子 β1 （Transforming growth factorβ1，TGF-β1） 诱导 hBMSCs 向软骨细胞分化。 方法：取 5～8 岁儿童四肢长骨骨折需髓内钉固定者，抽吸其钻孔后流出的骨髓， 通过分离、离心获得细胞，采用低糖 DMEM 培养基进行体外培养，采取流式细胞仪 对培养的细胞进行鉴定；使用倒置显微镜观测细胞形态及生长状况，绘制 hBMSCs 生长曲线。利用 TGF-β1 诱导 hBMSCs 向软骨细胞分化。对诱导后的细胞进行阿利新 蓝染色、蕃红花-亮绿染色检测细胞蛋白聚糖﹙Aggrecan ，GAG ），免疫组织化学染色 检测