基因工程双价、特异小分子抗体的研制.pdfVIP

中 文 摘 要 基因工程双价、双特异小分子抗体的研制 双特异抗体可以结合两种不同的抗原，具有特殊性能，在临床诊 疗中具有广阔的应用前景，目前为国际上研究热点之一。本研 利用单链抗体 (ScFv)构建两种基因工程双特异小分子抗体模型， 为双特异小分子抗体的开发和研究提供基础。 (ScFv是一个重链可变区(VH，一个轻链可变区(VL，由连接肤 (linker)连在一起构成的单价小分子抗体。为使其能组装成双价， 本研究对一个抗人红细胞SCFV和一个抗HBsAg人SCFV进行了改造， 将linker缩短，强迫不同分子间的V。和VL组合成Fv，从而形成双价 和双特异小分子抗体 (Diabodies)。在大肠杆菌中分泌表达的双特异 性Diabody，具有与HBsAg和RBC结合的双重活性，并具有双特异功 能— 即同时结合HBsAg和RBC，能使含有HBsAg的RBC悬液产生血 球凝集。证明了双价、双特异 Diabody模型的可行性。为了稳定 Diabody结构，经基因突变，构建了二硫键Diabody，结果使Diabody 的热稳定性和在尿素中的稳定性得到了一定程度的提高。 我们又利用重链恒定区CH3的双聚化作用，将ScFv基因与CH3 融合，构建了另一种双特异模型— mi