结核分枝杆菌耐性分析及利福平和氧氟沙星耐药基因的检测.pdfVIP

摘 要 目的：调查结核患者中结核分枝杆菌的耐药性，分析耐药结核分 药物利福平、二线药物氧氟沙星的耐药产生与rpoB基因、gyrA和gyrB 基因突变的关系，为结核分枝杆菌(MTB)的耐药性研究、耐多药 供新的实验依据。 方法：①收集湖南省胸科医院6535例就诊的肺结核患者的标本， 进行结核分枝杆菌液体培养及绝对浓度法药物敏感性实验(简称“药 敏实验”，DST)，检测培养菌株对链霉素(SM，S)、异烟肼(INH， K)和氧氟沙星(OFX，0)6种药物的敏感性，以结核分枝杆菌标 准菌株H37Rv为对照，获得菌株对6种药物的耐药谱。②选取利福 平耐药菌株，用超声波裂解法提取MTB基因组DNA，对与利福平耐 药相关的rpoB基因进行扩增、测序并比对其突变情况，分析基因突 变和耐药表型的关系。③选取氧氟沙星耐药菌株，采用超声波裂解法 进行扩增、测序，分析该两个基因突变与耐药表型的相关性。 结果：①结核分枝杆菌培养阳性1140例，初治患者826例，复 治患者314例；耐药肺结核患者443例，其中耐药初治患者296例， 万方数据