性别决定基因家族成员-2基因sox-%2c2-对大鼠肝再生作用的研究.pdf

摘要 性别决定基因家族成员．2SOX．2是SOX基因家族成员之一，与发育及细胞的分化与 去分化相关。受$0X2在诱导多能性干细胞相关方面研究的启发，本文以大鼠再生肝为材 料，用液压转基因技术(hydrodynamics-based 干涉的方法，初步研究了SOX2对大鼠肝再生过程的作用，为增加对SOX2在大鼠肝再生中 的作用和分子机理的认识提供了资料。 本文根据已发布的信息对80X2进行了克隆，并从其基因序列上挑选了两处靶位点设 计了两条干涉RNA片段，将这些经检测正确的片段分别连接在真核表达载体pEGFP．N1 各检验载体分别对再生肝模型大鼠进行液压转基因，并于转基因后0、6、12、24、36、 有明显下降，以此来判断设计的干涉片段是否对靶位点具有干涉作用。将表达载体和干 涉载体分别进行液压转基因操作，通过各载体的转染率找出其在大鼠再生肝组织中表达 高峰的时间点，并结合$0X2在大鼠再生肝组织中表达高峰的时间点，得出该基因在大鼠 部分肝切除(partial 肝再生模型和液压转基因技术展开了80X2对大鼠肝再生作用的研究。将转基因后的再生 技术对大鼠肝脏组织形态结构、表达动力学和肝指数等方面的结果进行观察与分析。 经过检测SOX2克隆成功，其表达载体、干涉载体和检验载体构建亦成功。经过对转 显的干涉作用，其中尤以干涉片段s370的干涉效果最佳。经过对转表达载体和干涉载 体后转染率的检测，并结合SOX2在大鼠再生肝组织中表达高峰的时间点，在PH后Oh 进行转基因效果最佳。对大鼠死亡率、组织形态结构、表达动力学和再生肝肝指数等方 相比有一定变化。 关键词：大鼠，肝再生，液压转基因，基因克隆与载体构建，基因添加与RNA干涉 ABSTRACT of ThememberoftheSOX SRY-box2sox2isrelatedto anddifferentiation genefamily development cell．Effectsof onthe ofliver inratswerestudiedusethe of SOX2 process regeneration by technique themethodof additionandRNAinterferenceinthis transgene，via gene paper,in hydrodynamics-based the mechanismofliver orderto basisfor thefunctionandmolecular provideexperimentalclarifying ofsox2 wascloned tothe sitesonthe two information，two designinterfering SOX2 accordingpublished target based andinterferencevectorswere RNA wereselectedonthe sequence，expressive fragments gene with above：the vectorwas constructedlinkedthe fightfragmentsdesigned expressive pEGFP-N1一SOX2， andtheothertwointerferenceve