乳酸菌对牙鲆粘的粘附、对致病菌的粘附抑制及体内定植的研究.pdf

乳酸菌对牙鲆粘液粘附、致病菌的粘附抑制及体内定植研究 摘要 本文用同位素(H3)标记法和异硫氰酸荧光素(FITC)标记法研究了两种乳 酸菌(Ll来自牙鲆肠道，L2为干酪乳杆菌)在牙鲆体表和消化道粘液的粘附及 其对四种致病菌的粘附抑制作用和牙鲆体内定植情况，同时研究了生长状况及培 养基pH的变化及体外抑菌作用。结果表明乳酸菌在牙鲆体表和消化道粘液中均 有粘附性，并能在消化道中定植。两种方法结果均表明L2在牙鲆体表和消化道 的粘附能力均强于Ll，在胃的粘附效果最好，其余部位差异不显著。荧光素标记 法测得LI和L2均在牙鲆胃内的粘附百分率最高分别是48．18％和63．0％。粘附 抑制试验显示Ll对白色念珠菌(Candidaalbicans)在各部位均无粘附抑制作用， 对荧光假单胞菌(尸Huorescen0粘附抑制作用最强，使其在牙鲆消化道粘液的 cholerae17017一们 粘附百分率下降了19．01％，其余依次为非Ol型霍乱弧菌(K L2对非01型霍乱弧菌粘附抑制效果最好，使其粘附百分率降低了2231％，使荧 光假单胞菌、嗜水气单孢菌和白色念珠菌分别下降了17．50％、12．69％、5．15％。 Ll在25h．75h期间为指数增长期，75h后进入稳定期：L2在48h前为指数增长期， 48h后进入稳定期。两种菌都引起pH的降低，L2的pH值变化较L1明显。乳酸 菌培养液上清液对非Ol型霍乱弧菌、荧光假单胞菌的抑制效果明显，对嗜水气 单胞菌和白色念珠菌无抑制作用。 通过投喂含有1．2X 109个佗乳酸菌的饲料，牙鲆消化道内的Ll和L2均能在 第5天时达到106个幢以上，在投喂含菌饲料的实验过程中，乳酸菌含量维持在 106．108个／g动态平衡中。L】和L2在牙鲆体内定植无种属特异性。在定植实验过 程中随着乳酸菌的含量的增加弧菌逐渐降低，乳酸菌含量达最高值时弧菌含量降 到最低，停喂7天后乳酸菌含量下降，弧菌数量有所回升。 每天按15mg／kg体重投喂盐酸环丙沙星药饵，处理7天后，鱼体内所测定的 3类细菌数均下降了101-102，随后的投喂Ll和L2带菌饲料，结果证实处理后成鱼 消化道较未处理组利于乳酸菌的定植，定植数量显著高于未投喂药饵组 (pO．01)，利于成鱼消化道菌群的重建，但不影响乳酸菌定植的时间。 关键词乳酸菌粘液粘附粘附抑制定植 ． 塾塑堕塑茎竺塾垫垫堕：鍪堕堕竺塑堕塑生!墨竺堕塞垫婴窒 Abstract strainsofLactic oftwo This theadhesion investigated paper skin enteronmucusof the of the and from Flounder；L2：L gut healthy Casei)to and and 1abeled adhesion H3TdRlabeledFITC methods，the Flounder inhibitory by of incourseofculture in enteronofFlounder。The theco