人ifn-λt;,1gt;基因的克隆、表达及抗病毒活性的研究.pdfVIP

厶!E丝：玉!些幽曲直隆!蠢丛丛埴然生活性鲢班盔 主塞垴蔓 人IFN-入1基因的克隆、表达及抗病毒活性的研究 泛的组织类型中(如血液、脑、心脏、卵巢、胰腺、垂体、前列腺、睾 诱导细胞2’，57—0As寡腺苷酸合成酶和MxA抗病毒蛋白基因的转录而 发挥抗病毒作用，此外还能诱导细胞膜上I类MHC抗原分子表达量的升 高。本研究通过基因工程和细胞工程技术设计了一种IFN_九1基因的体 外重组和表达方案，以探索IFN一九1基因表达和生物学功能。 第一部分人工FN一入。基因的克隆 摘要 目的探索获取IFN_^1基因克隆的方法。方法从经 stomatits 滤疱性口腔炎病毒(Vesicular transcribed chain polymerase 糖电泳和DNA测序证实RT—PCR所获取的片段确实为IFN—x 1基因的全 长序列(603bp)。结论成功克隆到了IFN-入1基因。 关键词 总RNA；RT-PCR：IFN一九1 T 厶iE丝：玉!基幽啦克隆：盎然丛抗蝤生活挂的虹究 史塞煎塞 第二部分人IFN一入，真核表达载体 pcDNh3．1A—IFN一入。的构建 摘要 目的探索构建IFN一入1真核表达载体的途径。方法用 EcoR 1基因和 I和BamHI二种限制性内切酶对经PCR获取的IFN—x a中进行转化后涂平板。结果对所挑取的 粒在感受态的大肠杆菌D145 阳性克隆经双酶切后进行电泳、PCR和DNA测序鉴定后，确认该真核重 —IFN-入。的真核表达载体。 关键词限制性内切酶； IFN—X，基因；pcDNA3．1A； 第三部分pcDNh3．1A—IFN～入。在COS一7 细胞中的表达及抗病毒活性的研究 摘要 目的将人IFN一入。基因转染COS一7细胞后，检测培养上 清液中所表达的IFN_入。的抗病毒生物学活性。方法采用脂质体介导 的真核细胞基因转染法，48小时后收集转染细胞上清液并进行抗病毒 活性的研究，与此同时对实验组和阴性对照组的COS一7细胞进行 RT—PCR，以判断人IFN-九。基因是否已转入细胞内和进行了有效表达。 1I 厶iE丛：＆!丛凼曲直隆!垂丛厦抗趟娄括挂曲班红 主童擅蔓 结果 实验组COS一7细胞上清液具有一定的抗病毒作用，实验组COS一7 条带。结论人IFN一入，基因已转入COS一7细胞内，并表达、分泌了具 抗病毒活性的IFN-入．。 关键词 脂质体： 真核转染； 抗病毒活性； 研究生：王建红 导师：杨吉成教授 厶i￡世：＆!基因曲直隆!盘垫丛埴蝤生活性盟蛆红 墓塞擅蔓 and Antiviral Cloning，Expression FunctionsofHuman Gene IFN一入l Abstract