人巨细胞病毒p150基因的原核表达及抗原性分析.pdf

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人巨细胞病毒p150基因的原核表达及抗原性分析

Y539512 中文摘要 人巨细胞病毒ppl50基因的原核表达及抗原性分析 中文摘要 目的 50的原核高效表达系 构建人巨细胞病毒(HCMV)PPl 统,制备用于活动性HCMV感染血清学诊断的基因工程抗原。 方法 利用DNAStar软件设计HCMV HCMV PPl 15份HCMV 份正常孕妇血清。 pMAI.p2.PPl50与pET.28a—PPl 重组表达质粒pMAl一p2. 切出一630bp的预期片段,表明重组正确。 50可在E.coli.DH5q中有效表达,表达产物为麦芽糖结合蛋白 ppl 50未 见明显表达带。表达产物经麦芽糖亲和层析树脂纯化后可见单一的 5)。 64KDa蛋白条带。Westernblot检测,阳性识别率为80%(12/1 结论 此重组蛋白具有良好的抗原性,进一步完善后用于 HCMV急性和/或活动性感染的诊断。 关键词 50爆因原核表达 血清学诊断 人巨细胞病毒PPl 7研究生 王清(病原生物学专业) 指导老师 张文卿教授 省教委资助课题编号J97k51 英文摘要 ofHuman ExpressionCytomegalovirus Prokaryotic its and Analysis gene Antigenicity ppl50 ToconstructHuman geneprokaryotic Objective Cytomegalovirus(HCMV)ppl50 for recombinant efficient the of serological clones,for antigen expression preparation infection. ofHCMV diagnosis fromthe ofHCMV A ofPCR werecreated Methods gene pair primers ppl50 strdJnandtworestriction and as of ADl69

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