乙酰肝素酶和sf-1cxcr4生物学轴在乳腺癌中的表达及其临床意义.pdf

I[Iitllt／llllq lIIIIl l 1 Iillll ＼1768752 目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………·l 英文论著摘要……………………………………………………………………·3 二、英文缩略语………………………………………………………………………·6 三、论文 青订言…………………………………………………………………………………………………………·7日U舌…………………………………………………………………………………………………………。， 实验材料与方法…………………………………………………………………·7 实验结果…………………………………………………………………………10 讨论………………………………………………………………………………………………………一18 结论………………………………………………………………………………………………………··20 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………21 五、参考文献…………………………………………………………………………22 六、附录 综述………………………………………………………………………………………………………”24 在学期间科研成绩………………………………………………………………32 致谢………………………………………………………………………………………………………”33 个人简介…………………………………………………………………………”34 ·中文论著摘要· 乙酰肝素酶和SDF．1／CXCR4生物学轴在乳腺癌中的 表达及其临床意义 目的 sulfate 乙酰肝素蛋白聚糖(Heparan proteoglyean，HPSG)一种葡萄糖醛酸内切酶， 可促进肿瘤的侵袭和转移。基质细胞衍生因子．1(SDF．1)及其受体CXCR4参 与许多病理生理过程，包括引起肿瘤细胞产生趋化运动，而肿瘤细胞的趋化运动 与肿瘤体内侵袭转移存在密切关系。细胞外基质的降解和肿瘤细胞的定向运动是 肿瘤浸润转移两个重要过程，研究显示乙酰肝素酶高表达与乳腺癌的侵袭转移相 关，SDF．1／CXCR4生物学轴的激活在乳腺癌向特定组织器官转移的过程中也起 到关键作用，但乙酰肝素酶与SDF．1／CXCR4生物学轴在乳腺癌发生发展过程中 是否存在协同作用尚无人探讨。本研究采用免疫组化及RT．PCR方法联合检测乙 酰肝素酶、SDF．1、CXCR4在乳腺浸润癌、导管原位癌、癌旁组织中的表达， 旨在明确乙酰肝素酶和SDF．1／CXCR4生物学轴在乳腺癌生长、浸润、转移中的 作用，探讨两者的相关性。 方法 l、材料 乳腺浸润癌、乳腺导管原位癌及癌旁组织均取自沈阳医学院奉天医院2002 年9月--2007年12月手术切除标本，其中免疫组化方法检测标本经10％中性福 尔马林溶液固定，石蜡包埋，RT-PCR方法检测标本新鲜组织立即放入．80。C冰箱 保存备用。 2、免疫组化 免疫组织化学染色采用SP法，将石蜡包埋的组织制成4 gm厚的切片，常 规二甲苯脱蜡，梯度酒精水化；修复抗原；滴加SP法检测试剂(具体操作按照说 一抗做阴性对照，已知阳性切片做阳性对照；4。C过夜；AEC显色5—10min； 苏木素复染；AEC封片胶及中性树胶封片。 3、ImPCR 总RNA提取过程严格按照RNAisoPlus试剂说明书进行。反转录过程也按 试剂说明书进行操作。循环条件为：94。C预变性3min，94C变性30s，53．5*0、