人巨细胞病毒p150和gp52融合基因的克隆表达及其重组蛋白的抗原性研究.pdf

英文缩略词表 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 Aml9 Ampicillin 氨苄青霉素 base 碱基对 bp pair DTT dithiothreitol 二硫苏糖醇 ELISA enzyme—linked 酶联免疫吸附试验 immunosorbent assay HRP horseradish 辣根过氧化物酶 peroxidase IPTG isopropylthio—D 异丙基硫代．B—D ··D-，galactoside 乳糖苷 kb kilobase 千碱基对 pair KDa kilodalton 千道尔顿 “mln rotationminute 每分钟转数 per PCR chainreaction polymerase 聚合酶链式反应 saline PBS buffered 磷酸盐缓冲液 phosphate 5一溴一4．氯．3一B—D X-gal 5-bromo··4--chloro··3--indoly 1一B—dgalactoside半乳酸苷 HCMVhuman 人巨细胞病毒 cytomegalovirus GST S-transferase谷胱甘肽转移酶 glutathione 中文摘要 人巨细胞病毒ppl50和gp52融合基因的克隆表达 及其重组蛋白的抗原性研究 中文摘要 人巨细胞病毒(f{CMV)是人类重要的病原体之一，孕妇初次感染HCMV，可导 致胎儿畸形或流产，HCMV的活动性感染可以危及免疫抑制患者的生命。鉴于感染 患者常常无症状或缺乏特异性症状，实验室检测技术具有极其重要的意义。 HCMV感染的检测方法包括病毒分离培养、抗原检测、核酸测定和血清学试验， 上述方法各有优缺点。HCMV原发感染的诊断，主要采用血清学方法，HCMV—IgM型 抗体是病毒抗原刺激机体最早出现的抗体，可作为活动性HeMV感染的一个重要指 快速和设备要求低的特点，但来源于病毒的抗原存在着敏感性、特异性和标准化 问题，基因重组获得表达产物的技术正引起各国学者重视，国内这方面的研究报 道不多。 gp52和ppl50 性较强的两种，能特异性识别IgM抗体。故而，本研究选择}leⅥV 的抗原性、特异性好的c端部分氨基酸的基因片段做目的基因，应用基因工程技 术，得到了高效表达两者融合基因的工程菌，并对表达产物的抗原性进行了研究。 研究包括两个部分：1．gp52基因在大肠杆菌中的诱导表达及重组蛋白的抗原性鉴 定；2．p