伤寒沙门菌耐药粒prst98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究.pdf

伤寒沙门萄耐药质粒pRs佛在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究 中文摘要 伤寒沙门茵耐药质粒pR。瑚在小鼠体内向 大肠埃希菌接合转移的研究 中文摘要 目的：研究伤寒沙门菌耐药质粒p飚”8在小鼠体内向大肠埃希菌 的接合转移，比较质粒在体内外接合转移的异同及影响因素。 方法：由于伤寒沙门菌是一种严格只对人类致病的病原菌，没有 合适的动物模型，因此将伤寒沙门菌的耐药质粒pRsT98导入遗传背景 明确的鼠伤寒沙门菌低毒株ILIA中，形成接合子pRs丁98／RIA，口饲 Bm卫／c小鼠进行体内耐药质粒接合转移的研究。 cohKl2 1．将伤寒沙门菌耐药质粒pRs”8导入大肠埃希菌E RIA，获得接合子pRsTgs／RIA。用药敏试验和质粒检测接合子的形成。 2．用SS培养基分离培养未经人工感染小鼠体内的大肠埃希菌， 生化反应鉴定获得的菌株，用药敏试验和质粒谱调查小鼠肠道细菌耐 药和质粒携带状况。比较小鼠肠道分离菌株耐药谱和pRs”8编码的耐 药性差异，以此制各SS抗生素选择性培养基。 08、107、 机分为4组，以低于pRsT98脚A半数致死I(LD50)的四种菌J_(1 伤寒沙门菌耐药质粒pR辨l在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究 中文摘要 素选择性培养基分离小鼠肠道大肠埃希菌。用生化反应鉴定后药敏试 验确定耐药谱，并进一步用质粒检测验{．tpRsTga在小鼠肠道内发生的 接合转移。 结果：1．在体外伤寒沙门菌很容易将耐药质粒pRsT98转移给大肠 埃希菌E 度不同，同一质粒在不同宿主菌中耐药标志的表达亦有差异。接合子 pRs口s／E．eohKl2W1485 中除Sm和Gm外，Cos的耐药标志亦未表达。 2．从未经人工感染小鼠肠道分离了100株大肠埃希菌，所有菌株 均有不同程度的耐药，其中对Ap的耐药率高达97％，Sm的耐药率为 42％，但所有菌株对Akn和Cp均敏感。未发现分离的小鼠肠道菌与 pRs”8有相同的耐药谱，据此分别选择Cm署l：ICp两种抗生素制备SS抗 生素选择性培养基。质粒检测未发现小鼠肠道菌有分子量与pRs”8相 近的耐药质粒存在。 3．口饲pRsr98／RIA后，第2天Ss抗生素选择性培养基即可筛选到 天共死亡4只。第30天抗生素选择性培养基分离菌株的阳性率为8l％ 直接关系。经生化反应鉴定，分离的菌株均为大肠埃希菌。药敏试验 ll 伤寒沙门菌耐药质粒pRs饼在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究————中j!!堕 显示阳性菌株的耐药谱发生改变，新出现的部分耐药标志与pRST98的 耐药谱相符，但有些抗生素的耐药标记未能全部表达。质粒检测显示 体内形成的接合子均含耐药质粒pRsr98。 结论：1．在体外耐药质粒pRsT98可以从伤寒沙门菌Styphi转移给 大肠埃希菌E ILIA。2．从未经人工感染小鼠体 转移给鼠伤寒沙门菌typhimurium 内分离的大肠埃希菌药敏试验发现，所有菌株对抗生素均有不同程度 的耐药。3．在小鼠体I勾pRs四胡uA很容易发生接合转移，经生化反应 证实获得的接合子均为大肠埃希茵。4．伤寒沙门菌耐药质粒pRsT98在 动物体内外的接合难易程度不同，同一质粒在体内外不同宿主菌中耐 药标志表达亦有差异，显示耐药质粒表达的多样性和复杂性。 关键词：伤寒沙门菌；大肠埃希菌；R质粒；接合转移 作 者：祁汝峰 指导教师：黄瑞 lIl 伤寒沙门菌耐药质粒pRs聊在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究 Absttact