猪瘟病毒spa同凝集试验及双夹心elisa检测方法的建立.pdf

摘要 牛睾丸细胞增殖猪瘟中国兔化弱毒c株(HcIⅣ)。HcLV株病毒液经反复冻融后 利用聚乙二醇6000浓缩并纯化，得到纯度较高的HcLⅣ。将浓缩纯化的病毒液 分别免疫家兔和猪，制各了兔抗Hcnr及猪抗HcL、，的高免血清，经饱和硫酸 铵沉淀、透析除盐后，获得了兔抗HcLv及猪抗Hc【Ⅳ免疫球蛋白IgG的粗提 物。 依据金黄色葡萄球菌细胞壁上的A蛋白(sPA)的特性，用富含A蛋白的金黄 色葡萄球菌国际标准株(CawanI)标记兔抗HcL、，及猪抗HCLv高免血清，建立 了诊断猪瘟的sPA平板协同凝集试验。用不同稀释度的抗血清制备sPA诊断液 进行协同凝集试验，兔抗HCLV原倍血清，猪抗HCLV阳性血清2倍稀释所得 诊断液效果最理想。对两种血清标记的sPA诊断液的灵敏度进行对比，兔抗 HcLv sPA诊断液抗原的最高检出浓度为：1：32，猪抗HcLⅣsPA诊断液抗原的 最高检出浓度为：1：64。与对流免疫电泳检测到1：2倍稀释的抗原相比，该方法 敏感性较高。通过对发病动物各脏器灵敏度的检测，证明在临床运用SPA协同 凝集法检测猪瘟的诊断中淋巴结和脾脏为最佳检测部位。此外，该操作简便、快 速，节省材料，无需特殊仪器，是一种适用于基层猪场对猪瘟的快速诊断和流行 病学调查