基因工程及其应用详解.pptVIP

限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程 DNA连接酶的作用过程 ？如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ 科学家利用基因工程的方法培育出了转 基奶牛、超级绵羊等多种转基因动物。 2001年5月，国务院公布了《农业转基因生物安全管理条例》，对农业转基因生物的研究和试验、生产和加工、经营和进出口等作了具体规定。 趋利避害，不能因噎废食。 * 基因重组 基因突变 杂交 自交 选种 自交 辐射诱变，激光诱变，空间技术育种 将不同个体的优良性状，集于一个个体上 提高育种频率，加速育种过程，或大幅度改良某些品种 时间长，需及时 发现优良品种 有利变异少，需大量处理实验材料 依据原理 常用 方法 优点 缺点 应用 实例 杂交育种 诱变育种 杂交水稻、黑白花奶牛 黑农五号大豆、高产青霉素菌株 课前复习 谁能告诉我这是ＷＨＡＴ？ 第2节基因工程及其应用 什么是基因工程？ 基因工程的原理是什么？ 转基因食品安全吗？ 基因工程有哪些应用？ 原 理： 操作水平： 结 果： 目的基因 供体细胞 受体细胞 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 获得新性状 一、基因工程(gene engineering) 基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 1、基因工程的 指“ 限制性核酸内切酶 ” 主要存在于微生物 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子 已发现的有200多种 种 类: 来 源: 特 点: 作用于： 磷酸二酯键 二、基因工程操作的工具 “ ” 点击播放 　　被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？ 思考: 形成的黏性末端不同 不同的限制酶呢？ 具有 2、基因工程的 指“DNA连接酶” 作用： 将互补配对的两个粘性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子 “ ” 点击播放 　　 DNA连接酶的作用位点是：相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成：磷酸二酯键。 3、基因的运载体 （2） 条 件 ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 ②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 ③具有标记基因，便于进行筛选 （3）常用的运载体： 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 （1）运载体的概念 标记基因，便于进行检测。 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　 （4）它们的共同特点是: 都有侵染或进入 宿主细胞的能力 三、基因工程基本步骤 1、获取目的基因 提取目的基因的方法 用限制酶切断成许多片段 ⑴直接分离基因——鸟枪法 　　将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段。　　 ⑵人工合成基因法 ①逆转录法：以信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下利用脱氧核苷酸合成DNA(基因)。②化学合成法 2、目的基因与运载体结合 注意：要用同一种限制酶切取目的基因和运载体，并用DNA连接酶连接。 3、将目的基因导入受体细胞 导入 扩增 常用的受体细胞： 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等 常用微生物作受体细胞的原因： 微生物增殖快、代谢快、目的产物多 4、目的基因的表达和检测 　　大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 （一）基因工程与作物育种 降低生产成本，减少农药的使用对环境的危害，提高农作物对不良环境的适应能力。 四、基因工程的应用 1、在农作物生产方面 目的： 优点： 培育出高产、稳产、抗逆性的优良作 物及新品种。 转抗寒基因的番茄 1、基因工程与作物育种 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) （一）基因工程与作物育种 2、在畜牧养殖方面 (二）基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 　　许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。 　　微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。 　　胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只