热休克蛋白70ny-eso-1多肽复合物的制备以及抗肿瘤效应的体外研究.pdf

热休克蛋白 70 和 NY-ESO-1 多肽复合物的制备以及抗肿瘤效应 的体外研究 中文摘要 【目的】 将原核表达纯化获得的人热休克蛋白 70 （heat shock protein70, HSP70 ）与 肿瘤睾丸抗原 NY-ESO-1 多肽体外连接制备 HSP70-NY-ESO-1 多肽复合物，检测 HSP70-NY-ESO-1 多肽复合物负载的树突状细胞（dendritic cells, DC ）对 NY-ESO-1 阳性肿瘤细胞的体外杀伤效率，探讨增强肿瘤免疫治疗的有效策略。 【方法】 1．人HSP70 的原核表达、鉴定及纯化：RT-PCR 技术获得人 HSP70 全长 cDNA， 将 PCR 产物克隆到原核表达载体 PET-30a 质粒上，酶切与 DNA 测序鉴定后，将 PET-30a-HSP70 重组质粒转化至大肠杆菌 Rosetta(DE3) ，IPTG 诱导蛋白表达，表 达产物行 SDS和 Western-blot 鉴定，His-tag 层析柱纯化 HSP70 蛋白。 2 ．人脐带血树突状细胞的