缺氧对新生大鼠马神经干细胞增殖分化的影响.pdf

·中文论著摘要· 缺氧对新生大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响 目 的 探讨单纯性缺氧对新生大鼠海马组织神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。 材料和方法 将36只新生ld 组)、Q5组(缺氧5h组)，每组12只。 1、原代培养 新生1天Wistar大鼠脑海马组织细胞在含有碱性成纤维生长因子(bFGF)、 表皮生长因子(EGF)和B27的无血清培养液中进行原代培养。 2、单克隆培养 当原代培养克隆球直径约为200／tm时，利用有限稀释法进行单细胞克隆培养。 3、传代培养 单细胞克隆培养形成的克隆球直径约200／llm时进行传代培养。 4、神经干细胞鉴定 当第3代细胞大多数克隆球直径约为200／zm时，部分克隆球进行巢蛋白 (Nestin)和烟酸己可碱33342(Hoechst33342)免疫荧光染色。 (2)诱导分化及染色 当第3代细胞大多数克隆球直径约为200／zm时，部分克隆球在含10％胎牛血 清的DMEM／F12培养基中诱导分化3d。诱导分化3d的细胞分别行神经元特异性 免疫荧光染色。 5、统计