mir-181通过靶向prkcd调节宫颈癌放疗敏感性.pdfVIP

MiR-181a通过靶向PRKCD调节宫颈癌放疗敏感性 摘要 目的：研究不同放疗敏感性的富颈癌组织中的miRNA表达的区别，筛选出放疗敏 感相关的miRNA，并且研究miRNA调节放疗敏感性的机制 材料和方法：假设miRNA能调节宫颈癌放疗敏感性，使用miRNA芯片筛选出不同 放疗敏感性的宫颈癌的miRNA的表达。Real--timePCR验证miRNA芯片筛选的 结果。根据差异表达的倍数和P值，挑选出miR--181a作为课题主要研究的miRNA。 选择放疗不敏感的宫颈癌细胞SiHa，放疗敏感的宫颈癌细胞Mel80作为课题研 隆形成实验检测放疗敏感性。用慢病毒载体构建稳定转染miR--181a的稳转株， 体外体内实验验证稳定转染株的放疗敏感性。增殖实验，周期实验，凋亡实验检 测miR—i81a调节放疗敏感性的可能机制。mRNA芯片和生物信息软件预测miR 一181a可能的靶基因。双荧光素酶实验验证靶基因。Real-timePCR，western blotting，克隆形成实验验证靶基因的表达和功能。 结果：我们采用miP,NA芯片技术筛选ll例放疗敏感和7例放疗抵抗的宫颈癌标 本中的miRNA表达谱，筛选出与放疗敏感相关的miRNA。结果我们筛选出8个与 181a能抑制宫颈癌细胞的放疗敏感性，低表达miR-181a能促进宫颈癌细胞的 放疗敏感性