neuropiin-1单克隆抗体的制备及初步鉴定.pdf

中文摘要 摘要 endothelial 的结合，能够介导神经系统的发育，同时，通过与VEGF(vascular growth NRP．2 2个成员，其中NRP．1在神经和心血管的发育中起到了关键性的作用； 而NRP．2则在神经和淋巴管的生长过程中发挥作用。更重要的是，NRPs高表 达于多种肿瘤细胞表面，并参与肿瘤的生长和肿瘤血管的生成。研究显示，阻 断NRP．1与VEGF的结合，既能直接抑制肿瘤的生长，也能通过抑制肿瘤血 管的生成间接抑制肿瘤生长。因此，NRP．1被认为是继VEGF后又一重要的， 也是最有希望的抗肿瘤新靶标。本文通过基因工程技术获取了NRP．1blb2结 构域的基因序列并表达蛋白，继而利用杂交瘤技术获得特异性针对此结构域的 单克隆抗体。 我们利用RT-PCR技术获取NRP一1blb2结构域的基因，并将其克隆至质 粒pET22b(+)，获得原核表达载体NRP一1blb2一pET22b(+)；重组质粒转化至 E．coli Rosetta中，IPTG诱导表达，优化IPTG诱导剂量和诱导