oecs上清液导nscs分化前后膜蛋白质复合物的差异表达研究.pdf

摘 要 第一章0ECs培养及上清液对NSCs的诱导分化研究 目的：探索小鼠嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells，0ECs)对神 stem 经干细胞(neuralcells，NSCs)分化的影响。 方法：健康新生昆明小鼠10只，取大脑皮层组织，用含2％B27、l ％N2、 20 fibroblast ng／ml碱性成纤维生长因子(basic growth factor，bFGF)矛口20 ng／ml表皮生长因子(epidermalgrowthfactor， EGF)的培养液对NSCs进行悬浮培养，每5—7天传代一次，纯化培养 2—3代备用，免疫细胞化学法对NSCs进行巢蛋白(Nestin)鉴定：取 新生昆明小鼠嗅球，O．25％的胰蛋白酶37℃消化，改良Nash差速贴 壁培养，加阿糖胞苷抑制杂细胞生长，当细胞数量达到大约80％时 吸出上清，加入新鲜培养基(无血清DMEM)，反复冲洗3遍，收集条 件培养液，每隔3天半量换液。一20℃保存条件培养液，免疫细胞化