raav9载体导tβ4基因靶向治疗心肌缺血的体外研究.pdfVIP

摘要 川Y舢2删3圳2洲6删m舢5 Ⅲ4 目的 构建含有心肌特异性启动子心脏肌钙蛋白T启动子(cTnT启动子) adeno．associated 关病毒(recombinant virus，rAAV)载体质粒 pAAV-cTnT-TIM—Mye，CMV启动子介导的pA 质粒，并包装6型和9型重组腺相关病毒，体外感染原代心肌细胞 (Primary 代心肌细胞中的表达。 方法 连接构建成重组质粒pAAV-cTnT-TIl4一Myc和pAAV-CMV-T阻．Myc。 检测 过三质粒共转染法转染293细胞，即可得到重组6型和9型腺相关病 毒载体，纯化后的病毒采用Dot Blot法检测病毒滴度，SDS．PAGE检 测病毒纯度。 3．rAAV6一CMV-T[14一Myc病毒表达功能的验证 染色、DAPI染色及两者混合染色。 4．rAAV6一CMV-Tp4一Myc病毒表达的检测 Western Blot检测T即一Myc基因的表达。 结果 3．rAAV6一CMV-T134一Myc病毒能在原代心肌细胞内表达。