不同阶段宫颈上病变组织中人乳头瘤病毒16型转化基因e7和e5序列多态性分析.pdfVIP

不同阶段宫颈上皮病变组织中 人乳头瘤病毒16型转化基因E7和E5序列多态性分析 摘 要 目．的 HPVl6的基因突变存在地域差异，本研究拟通过分析宫颈癌组织中及不同病变 宫颈细胞中HPVl6E7和E5基因的突变情况，探讨青岛地区不同阶段宫颈上皮病变组 织中人乳头瘤病毒16型转化基因E7和E5序列的多态性，以及序列变异与宫颈病变的 相关性。 材料与方法 [1】收集山东青岛地区宫颈癌新鲜组织120例，其中宫颈鳞状上皮细胞癌107 62例宫颈原位癌。 [2】用蛋白酶K法，OMEGA试剂盒分别提取新鲜组织和细胞DNA。 [3】以提取的DNA为模板，采用PCR技术，以通用引物筛选出感染高危型HPV 的宫颈标本，然后用HPVl6型特异性引物筛选出HPVl6阳性标本。 【4]以HPVl6阳性标本DNA为模板，扩增E6、E7、E5基因全序列。 [5】所获基因全序YlJPCR产物纯化后测序，与德国HPV标准株进行比对分析，寻 找HPVl6E7和E5的突变位点，并比较热点突变位点突变频率在各组的差异。 结果 36．36％(28／77)、60％(80／120)。 44．17％(72／163)。 [3]HPVl