慢病毒载体介导na干扰沉默livin基因对大肠癌ht-29细胞祼鼠移植瘤生长及化放疗敏感性影响的研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 本课题体外实验部分已经证实慢病毒载体介导的RNA干扰能高效、稳定的 力减弱，细胞凋亡增加，细胞周期重新分布，能增强5．Fu、奥沙利铂和伊立替 康的抗肿瘤作用。现进一步通过体内实验探讨慢病毒载体介导RNA干扰沉默 Livin基因表达，对大肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤生长及对放化疗敏感性的影响， 初步阐明Livin是否可成为大肠癌治疗的一个新靶点。 方法： 1．将正常培养的HT．29细胞(空白对照组)、转染携带Livin基因短发 夹RNA(short hairpin 及转染携带无关序列片段shRNA慢病毒的HT．29细胞(阴性对照组)分别 接种于BALB／C(nu／nu)裸鼠，建立皮下移植瘤裸鼠模型，观察裸鼠体重及瘤 mRNA 体积的变化。第42天处死裸鼠后取下肿瘤组织，RT．PCR分析Livin 表达的变化，免疫组化分析Livin蛋白表达的变化，TUNEL法检测细胞凋亡 的变化。 2．将第一代大肠癌HT．29细胞皮下移植瘤瘤组织块接种至裸鼠，待长 成一定体积后分别瘤内注射干扰慢病毒(实验组)、空载慢病