整合素β1介导胱癌丝裂霉素c化疗抵抗中的作用研究.pdfVIP

上海交通大学博士论文 整合素p1介导膀胱癌丝裂霉素C化疗抵抗中的作用研究 摘要 背景与目的： 膀胱癌细胞粘附于细胞外基质纤维连接蛋白(FN)，对丝裂霉素C(MMC) 的化疗呈现抵抗性。本研究通过体外细胞实验鉴定整合素pl在介导膀胱癌细胞 与FN粘附中的作用，探讨整合素p1在细胞粘附介导的MMC抵抗中发挥的作 用。本研究还通过建立整合素D1表达下调的膀胱癌细胞和裸鼠膀胱癌皮下移植 瘤模型，在动物体内研究下调整合素B1的表达对MMC治疗膀胱癌疗效的影响。 材料和方法： 1功能阻断性抗体封闭膀胱癌细胞表面的整合素B1分子，细胞粘附实验观 察细胞在FN上的粘附，流式细胞学方法检测MMC诱导膀胱癌凋亡的变化。 2设计、合成siRNA(small interferinggNA)，干扰膀胱癌细胞整合素Bl的 流式细胞学方法检测生长在FN上的膀胱癌细胞的凋亡变化，并采用western试 验检测细胞内凋亡信号通路分子P13一K(Phosphatidylinositol3-kinases)、AKT、 p-AKT的表达改变。 (short RNA)表达载体，基因转染技术将其转入包装细胞293T。包装产生 ha