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超顺磁氧化铁纳米粒介导bFGF转染猫角膜内皮细胞 中文摘要 超顺磁氧化铁纳米粒介导bFGF转染猫角膜内皮细胞 中文摘要 目 的 用经过多聚赖氨酸修饰的超顺磁氧化铁纳米粒子作为基因载体，将携带碱性成纤 维生长因子的绿色荧光蛋白质粒pEGFP—C厂bFGF转染至体外培养的猫角膜内皮细胞， 并初步研究其转染效果，探讨超顺磁氧化铁纳米粒子作为一种新型基因载体进行体外 角膜内皮细胞基因转染的可行性。 本实验分两部分： 第一部分：猫角膜内皮细胞培养及鉴定。 ． 其表达的观察。 方法 第一部分：无菌条件下取猫龄小于3个月的猫眼球，沿角膜缘剪开取角膜片，按 揭取后弹力层培养法进行角膜内皮细胞的原代及传代培养。倒置显微镜下观察不同阶 段培养的细胞的形态，用台盼蓝染色计数各代活细胞的百分数。并用NSE抗体对传代 培养的细胞进行鉴定，观察传代细胞是否保持有角膜内皮细胞的特性。 第二部分：用多聚赖氨酸为修饰物，使多聚赖氨酸通过静电作用结合于超顺磁氧 因转染至体外培养的猫角膜内皮细胞。在倒置荧光显微镜下观察