非小细胞肺癌9d细胞株目的microrna的筛选及let-7a体外调控95d细胞侵袭能力的实验研究.pdf

中文摘要 体外调控95D细胞侵袭能力的实验研究 中文摘要 第一部分目的microRNA的筛选和let-7a在肺癌组织中的表达 【目的】筛选非小细胞肺癌95D细胞株的目的microRNA。 【方法】通过对CpG 芯片检测，筛选出变化幅度最大的microRNA。用Real-timePCR方法检测和验证目的 microRNA在20例非小细胞肺癌患者肺癌组织和正常肺组织标本中的表达情况。 【结果】经CpG 肺组织，肺癌组织中let-7a的整体表达明显低于正常肺组织，仅为后者的60％，差异 具有统计学意义。 ’ 第二部分let一7a慢病毒载体的构建与鉴定 【目的】构建let-7a慢病毒载体并进行鉴定。 【方法】分别构建let-7amimics和let-7ainhibitor慢病毒载体并包装。测定慢 病毒滴度，并进行靶细胞侵染实验。 的效率可达到95％左右，符合实验要求。RT-PCR检测证实，转染let一7amimics慢病 毒载体的95D细胞表达高水平的let-7a，而转染le