【金版学案】20142015学年高中生物专题五课题3血红蛋白的提取和分离新人教版选修1课件.ppt

* 专题5　DNA和蛋白质技术　　　　　　　　　　　　　 　　　　　课题3　血红蛋白的提取和分离 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质的研究与应用，首先需要获得纯度较高的蛋白质。因此，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常要做的工作 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 请思考： 1．怎样从血细胞中提取血红蛋白呢？ 2．用猪血和鸡血提取血红蛋白，效果一样吗？ 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 1．概念 ____________是根据____________________分离蛋白质的有效方法，也称作分配色谱法。 一、凝胶色谱法——血红蛋白的分离方法 凝胶色谱法　 相对分子质量的大小 多孔球体　 多糖类化合物　 贯穿的通道　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 (2)分离原理： ①相对分子质量较小的蛋白质：容易进入________的通道，路程________，移动速度较慢，通过凝胶柱的时间________。 ②相对分子质量较大的蛋白质：无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程________，移动速度较快，通过凝胶柱的时间________。 凝胶内部　 较长　 较长　 较短　 较短 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 二、缓冲溶液 1．作用 在一定范围内，缓冲溶液能够抵制______________对溶液pH的影响，维持pH基本不变。 2．配制 通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，调节缓冲剂的____________就可以制得在______________________________的缓冲液。 外界的酸和碱 使用比例　 不同pH范围内使用 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 三、电泳——血红蛋白的分离或鉴定方法 1．概念 带电粒子在________的作用下发生________的过程。 2．原理 (1)许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有________________，在一定的pH下，这些基团会带上________或________。 电场　 迁移 可解离的基团　 正电　 负电　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 (2)在电场的作用下，这些带电分子会向着______________________________移动。 (3)电泳利用了待分离样品中各种分子________________以及分子本身的________、________的不同，使带电分子产生不同的__________，从而实现样品中各种分子的分离。 与其所带电荷相反的电极　 带电性质的差异　 大小　 形状　 迁移速度 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 四、蛋白质的提取和分离过程 　蛋白质的提取和分离一般分为四步：________、粗分离、________和纯度鉴定。 样品处理　 纯化 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 一、血红蛋白的提取和分离的原理 1．蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析 后从凝胶柱中洗脱出来 先从凝胶柱中洗脱出来 洗脱顺序 较长 较短 运动路程 较慢 较快 运动速度 无规则的扩散运动 垂直向下运动 运动方式 小于凝胶颗粒空隙直径 大于凝胶颗粒空隙直径 直径大小 相对分子质量小 相对分子质量大 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 2.电泳原理及方法 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团，它们在某个特定的pH中会带上正电或负电；在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接