拟南芥AtDWD和ABI2相互作用的初步研究.pdfVIP

2O15年 7月 四川大学学报 (自然科学版) July．2015 第 52卷 第 4期 JournalofSichuanUniversity (NaturalScienceEdition) Vo_【52 No．4 doi：103969／j．issn．0490—6756．2015．07．028 拟南芥 AtDWD与 ABI2相互作用的初步研究 袁德志，李德款，赵 哲，杨 昊，杨 毅 (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064) 摘 要 ：本 文 以RCAR1为诱饵蛋 白通过酵母双杂交 (Y2H)技术筛选 出了DWD基 因编码 的蛋 白，同时在用 ABI2参与筛选的过程 中，同样得到了DwD这个基 因．进行 了pulldown 实验验证它们之 间的相互作用，实验结果显示：在体 外，RCAR1、RCAR3与 DWD之间确 实存在相互作用，同时ABI2与 DWD也存在相互作用．其后对 DWD结构 的进行分析和实 验 ，发现 ABI2和DwD的相互作用区域集 中在 AtDWDC端 ，大概是 145～350位氨基酸之 间的 WD40结构域里． 关键词：酵母双杂交；Pulldown；PP2C；AtDWD 中图分类号 ：Q945 文献标识码：A 文章编号 ：0490—6756(2015)04—0865—06 Prelim inarystudyofproteinsinteractingbetweenABI2and AtDW D inArabidopsisthaliana N Dg—Z ，LJDe—Kuan，ZHA0 Zhe， NG H ao， rANG (KeyLaboratoryofBio—resourcesandEco—EnvironmentofM inistryofEducation， CollegeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China) Abstract：AtDWD (WD40)proteinwasobtainedbyusingyeasttwo—hybridscreeningwith thebaitof RCAR1informerwork．FurtherstudiesdemonstratedthatABI2 (akindofPP2C)couldinteractwith AtDW D．Duetothedeficiencyoftheyeasttwohybridtechnology。thisstudyusedGST pulldown to determinetheinteractionbetweenABI2andAtDW D．Theresultsshowedthattheinteraction between AtDW D andABI2wasexist．Inadditionthestudyshowedthat145～35OaaintheC terminusofAtD- W D interactedwithAB12 (PP2C)． Keywords：Yeasttwohybridsystem；Pulldown；PP2C；AtDWD START结构域 ，被鉴定为 ABA受体蛋 白3【]．研 1 引 言 究者们通过研究发现这一类 RCARs蛋 白能够与 作为植物激素，ABA在植物抗逆机制 中不可 PP2C (AB11、ABI2、HAB1和 PP2CA／AHG3) 或缺 ，同时ABA在植物胁迫应答和生长发育中也 发生相互作用 ，从而抑制 PP2C 的活性 [4_6]．而 起着十分重要 的作用 [1]．至 ABA 发现以来 ，对 PP2Cs，包括 ABI2抑制着下游基 因SnRK2s亚家 ABA及其相关作用机理的研究